大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
檢測方法：酶聯免疫法
品牌：佰利萊
標記物：HRP標記物
應用：定性/定量/酶活檢測
貯藏條件：2-8℃
有效期：6個月
標本：血清、血漿、組織液、組織勻漿等
一、組織勻漿的制備
1、取組織塊（0.1g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，濾紙拭干，準確稱重，放入5ml的勻漿管中。
2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。
3、勻漿的方式：手工勻漿，機器勻漿。
① 手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手將搗桿垂直插入套管中，上下轉動研磨數十次（6～8分鐘），充分研碎，制成10%的勻漿液。
② 機器勻漿：用組織搗碎機10000～15000 轉/分 上下研磨制成10%組織勻漿，也可用內切式組織勻漿機制備（勻漿時間10秒/次，間隙30秒，連續3～5次，在冰水中進行,可適當延長勻漿時間），鏡檢觀察:
4、將制備好的10%勻漿液用普通離心機或低溫低速離心機3000轉/分左右,離心10～15分鐘，取上清液進行測定.
二、勻漿介質 一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據樣本及測定指標的情況自行設定濃度,目的是保持樣本的等滲環境。
三、樣本保存:
植物組織樣本暫時不測定，可立即低溫凍存，溫度越低越好，中間如反復凍融，-20℃以下可保 存三個月,-70℃以下可保存六個月
試劑準備：
試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡后方可使用。
1.標準品復溶：試劑盒提供6管標準品，每管已標定濃度，并且凍干。實驗前在每個標準品管中加入0.5mL稀釋液，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動助其溶解，使其恢復為每個標準品管身標注的濃度。
2. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
試劑盒自備材料：
1）蒸餾水。
2）加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振蕩器及磁力攪拌器等。
大鼠17-羥孕酮(17-OHP)ELISA試劑盒
細胞樣品前處理：
a)對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。
c)對于組織樣品： 把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。
用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
2、后處理：
將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。
免責聲明：
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
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