名稱JM(人T淋巴細胞白血病細胞)(STR鑒定正確)

　　背景描述T-cell line derived from the peripheral blood of a 14-year old male with T-cell leukemia.JM is isolated from the same patient as Jurkat。JM has the ability to grow HIV.

　　種屬人

　　年齡（性別）男；14歲

　　組織來源外周血

　　生長特性懸浮細胞

　　細胞形態(tài)淋巴細胞樣

　　細胞類型腫瘤細胞

　　腫瘤類型白血病細胞

　　生物安全等級1

　　生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10%FBS＋1%P/S

　　推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

　　推薦換液頻率2~3次/周

　　倍增時間~35.2 hours

　　凍存條件

　　凍存液：55%基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

　　溫度：液氮

　　培養(yǎng)條件

　　氣相：空氣，95%；CO2，5%

　　溫度：37℃

　　注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

　　細胞培養(yǎng)步驟：

　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完quan培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

　　1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的完quan培養(yǎng)基終止消化。

　　3.輕輕吹打細胞，完quan脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

　　4.按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

　　PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右完quan培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代（方法同上）。

　　智立中特（武漢）生物科技有限公司主要致力于質粒微生物資源的保護、共享和持續(xù)利用，圍繞我國生命科學研究、生物技術創(chuàng)新和產業(yè)發(fā)展等重大需求，探索、發(fā)現、收集國內外的微生物資源，妥善長期保存管理；在保證生物安全和保護知識產權的前提下，為工農業(yè)生產、衛(wèi)生健康、環(huán)境保護、科研教育提供質粒載體物物種資源、基因資源、信息資源和專業(yè)技術服務。旗下質粒載體網是一款提供質粒載體展示及定制的專業(yè)型網站，由智立中特（武漢）生物科技有限公司聯(lián)合多家企業(yè)公司科研院校共同打造！主要展示了各種基因類型下的質粒載體！

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