薄層色譜硅膠板的顯色方法:
一、光學檢出法
1.紫外光(254nm或365nm)
2.自然光(400~800nm)
3.熒光一些化合物吸收了較短波長的光,在瞬間發射出比照射光波長更長的光,而在紙或薄層上顯出不同顏色的熒光斑點(靈敏度高、專屬性高)
二、物理顯色法
用紫外照射分離后的紙或薄層后,使化合物產生光加成,光分解、光氧化還原及光異構等光化學反應,導致物質結構發生某些變化,如形成熒光發射功能團。發生熒光增強或淬滅及熒光物質的激發或發射波長發生移動等現象,從而提高了分析的靈敏度和選擇性。
三、蒸汽顯色法
多數有機化合物吸附碘蒸氣后顯示不同程度的黃褐色斑點,這種反應有可逆及不可逆兩種情況,前者在離開碘蒸氣后,黃褐色斑點逐漸消退,并且不會改變化合物的性質,且靈敏度也很高,故是定位時常用的方法;后者是由于化合物被碘蒸氣氧化、脫氫增強了共軛體系,因此在紫外光下可以發出強烈而穩定的熒光,對定性及定量都非常有利,但是制備薄層時要注意被分離的化合物是否改變了原來的性質。