產品類別：人源細胞系

　　生長特性：貼壁

　　生長培養體系：MACOY'S5A+10%FBS；37℃，5%CO2

　　傳代方法：1：2傳代

　　細胞形態：上皮細胞樣

　　凍存條件：無血清細胞凍存液保存條件：95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

　　細胞英文(簡稱）U2OS；U2-OS；U-2OS(已通過STR鑒定）

　　細胞名稱U2OS；U2-OS；U-2OS；人骨肉瘤細胞【已通過STR鑒定】

　　背景資料

　　該細胞系(原名2T)是由PontenJ和SakselaE在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。與WI-38共培養或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補體結合試驗（CF法）未檢測到病毒。該細胞表達胰島素樣生長因子Ⅰ、Ⅱ（IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ）受體和骨肉瘤衍生生長因子（ODGF）。

　　細胞來源ATCCHTB-96

　　代次P3

　　規格T25

　　細胞數1x10^6cells

　　生物安全級別2

　　組織來源骨肉瘤

　　細胞形態貼壁

　　細胞活力95％（ViabilitybyTrypanBlueExclusion）

　　細胞檢測細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

　　培養條件MACOY'S5A+10%FBS；37℃，5%CO2

　　傳代方法建議1:2-1:3兩天換液一次

　　凍存條件90%FBS+10%DMSO

　　細胞收到后處理：

　　細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完quan培養液并封好瓶口是細胞運輸的最hao辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完quan培養液收集至離心管中，加入6ml完quan培養基，放入37℃、5%CO2孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松）

　　細胞培養步驟：

　　1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL完quan培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　1、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

　　1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

　　2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的完quan培養基終止消化。

　　3.輕輕吹打細胞，完quan脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

　　4.按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含5-6ml培養液的新皿中或者瓶中。

　　PS：若客戶收到2ml小管細胞，收到細胞后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內，嚴格無菌操作；將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿，加入5ml左右完quan培養基混勻，放入培養箱過夜培養后查看細胞密度：若密度未超過80%，換液繼續培養，視情況傳代或者凍存。若密度超過80%，可直接進行傳代