人膀胱癌細胞
產品類別:人源細胞系
生長特性:貼壁生長
培養體系:MEM+10%FBS
傳代方法:1:2傳代
細胞形態:上皮細胞樣
凍存條件:無血清細胞凍存液
保存條件:95%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
傳代方法1:2傳代
傳代情況2~3天換液
培養體系溫度:37℃;氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞描述本庫的細胞僅用于科研工作,未經許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細胞轉讓給第三者。
凍存條件完quan培養基50%+40%FBS+10%DMSO,液氮
細胞收到后處理:
細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完quan培養液并封好瓶口是細胞運輸的最hao辦法。收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內,嚴格無菌操作,培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完quan培養液收集至離心管中,加入6ml完quan培養基,放入37℃、5%CO2孵箱培養;超過80%匯合度時,根據情況傳代或者凍存,具體操作見細胞培養步驟。(注意發貨的是密封培養瓶的話,放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松)
細胞培養步驟:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL完quan培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法三:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
1)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。棄培養基后加入少量胰mei,細胞變圓脫落后,進行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO
PS:若客戶收到2ml小管細胞,收到細胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內,嚴格無菌操作;將小管細胞轉移至T25培養瓶或6cm培養皿,加入5ml左右完quan培養基混勻,放入培養箱過夜培養后查看細胞密度:若密度未超過80%,換液繼續培養,視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代。
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