細胞培養芯片-BE-TRANSFLOW
概述
BE-TRANSFLOW是一種用于仿生條件下細胞培養的多功能微流控芯片。它允許2D-3D組織培養與建立流動和氣液界面 (ALI)的可能性相結合。仿生學微型芯片在體外復制不同的組織 結構。 典型應用實例有免疫系統體外模型、腫瘤轉移體外模型、 皮膚和腸道芯片模型。
材質
BE-TRANSFLOW芯片由生物相容性材料制成，且氣體不滲透，可以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學性能， 具有高透明度和低自熒光。
技術特點
BE-TRANSFLOW芯片包含兩個獨立的孔，孔底為多孔膜。 多孔膜與底層通道相連。帶有螺旋狀的進口和出口儲液池，用 于連接接頭和毛細管路。防蒸發儲液池位于培養液儲液池旁邊， 培養期間，毛細管封閉系統之前，將PBS或水灌滿防蒸發儲液池。
產品經過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下，避免陽光直射，干燥處存放。
細胞培養涂層
BE-TRANSFLOW芯片經過處理，表面親水，便于用水溶液和/或凝膠填充，以促進細胞粘附。
如果需要特定包被涂層，根據廠家的說明準備涂層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)并應用到每個通道。 吸出涂層溶液，使用通道體積5-10倍的蒸餾水或PBS洗滌，去除多余的涂 層溶液。
填充和處理 1. 對細胞進行裂解和計數。細胞濃度隨細胞類型而變化。
建議在2-3天內接種細胞以獲得融合層。 2. 接種細胞。支持單分子層、水凝膠或兩者同時接種。 2A. 在膜上方的通道中接種細胞。 2B. 在膜下接種單層細胞。將下層通道填滿細胞，并將其翻轉， 促進細胞附著。如果進行此實驗驗，首先在底層通道中接種細胞， 當細胞成功附著后，翻轉芯片并繼續按照協議在上面的通道中接 種細胞。 用P-100或P-1000移液管取100 μL帶細胞的培養液，加到進樣口。 培養液通過通道流到出口。注意將進口(1)填滿，出口(2)空出，壓 力差將平衡進口和出口之間的培養液。在防蒸發儲液池中加水或 PBS以避免蒸發。
3. 細胞粘附于表面(時間因細胞類型而異)。 4. 如果不連接流體控制系統，請在培養液儲液池中添加所需的培養 液。為此，在進口旁邊的培養液儲液池中小心地添加培養液，壓 力差將平衡進口和出口之間的培養液。 5. 如果連接流體控制系統，將接頭接在出口和進口(按此順序)。入 口和出口設計為標準連接(UNF 1/4”- 28)。請記住，在連接設備和 毛細管之前，須先將儲液池填充。 也可以用搖床把介質從一個儲液池移到另一個儲液池。當每個儲液池 的最終體積為100 μl時，可以施加45°傾角。
流體控制系統的配置
Beonchip對流體控制系統的配置提出了一些建議。 前處理: 1. 在培養箱中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。 2. 將系統放置在超凈臺中。 3. 在安裝流體控制系統之前，細胞須良好地粘附在表面。
4. 芯片內部或入口/出口需要填充滿培養液。 組裝流體控制系統，需考慮以下事項: 1. 將入口填滿培養液，防止有氣泡殘留。 2. 在組裝系統之前，先將連接到入口的毛細管準備好。 3. 入口和出口都連接標準接頭(UNF 1/4”- 28)。當系統準備好，將接 頭連接在進口。過程中須非常小心，以確保沒有氣泡進入系統。 4. 將毛細管連接到出口，封閉系統。 5. 檢查系統是否有泄漏。在將系統放入生物反應柜或培養箱之前， 讓泵運行幾分鐘。 注意：為防止過程中產生氣泡，請避免將移液管倒空。當從吸液口移開 移液管時，緊緊握住柱塞，以免負壓將溶液吸走。 細胞接種 下面是應用實例，以便更好地理解該芯片。 芯片可以進行單培養或共培養。在膜上和/或下接種不同類型的細胞 單分子層(1和2)。為了更實際的分析，可以在膜上添加水凝膠細胞培養物 (3)。
細胞顯微觀察的準備
可監測固定的或活的細胞和化學梯度。傳統細胞培養中使用的大多數 監測系統都可以用于BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也可用。細胞活力可以用不同的染料來評估。此外，免疫熒光染色可識別特異性靶點。 細胞周期熒光記錄儀也可以使用。
其他讀數 可以復蘇細胞，以便進行下游應用，如流式細胞，RNA提取(PCR)… 欲了解更多信息，請聯系BEC。
