細胞簡介:
大鼠骨骼肌分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 骨骼肌組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7626 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 ,英文名: Tn-Ⅰ ELISA Kit
Rabbit P53 (P53) ELISA Kit 兔p53(p53)試劑盒
牛(BCV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體
體液鈣離子濃度熒光定量試劑盒20次
ELISAKit6-OHDA人6-羥多巴胺
豬肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
eIF4A1蛋白抗體
豬生長激素(GH)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 10 (KLK 10) ELISA Kit 人10(KLK 10)試劑盒
GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG-1ELISAKit大鼠血管生成素1
血液氧化酶(DAO)活性熒光定量試劑盒20次
Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit豬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒
雙特異性磷酸酶2抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原
JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 Protein
B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白
SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
大鼠骨骼肌成纖維細胞Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原
B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 Protein