細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠牙齦上皮分離自牙齦組織;牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織,呈粉紅色、有光澤、質堅韌。牙齦邊緣稱為齦緣,正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦,通稱牙床;是指包住齒頸的黏膜組織,粉紅色,內有很多血管和神經。牙齦上皮長期被認為是抵御口腔中持續存在的細菌的被動免疫屏障,隨著對牙周致病菌的不斷認識,發現牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障,上皮細胞還可以分泌抗菌多肽,參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障,在抵御牙周炎細菌入侵的過程中發揮了重要作用,建立正常牙齦上皮細胞體外培養體系,將為各種牙齦上皮相關的研究提供穩定的實驗模型。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的大鼠牙齦上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 牙齦組織 | 產品貨號 | YS-01X7582 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白介素1(IL-1)試劑盒 ,英文名: IL-1 ELISA Kit
Rabbit collagenase II (Collagenase II) ELISA Kit 兔子膠原酶II(Collagenase II)試劑盒
ELISA 小鼠巨嗜細胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1) 進口分裝
CLIAKitforIL-23(HumanIerleukin23)ELISAKit人白介素23
通用型抗酸性0酸酶(SACP)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitGP-ⅡbⅢa大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa
乙醇脫氫酶(ADH)測定試劑盒(紫外比色法)
微量游離血紅蛋白(FHb)測定試劑盒(比色法)
超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒
測定試劑盒(紫外比色法)
KIAA1310蛋白抗體
鴨子白介素12(IL-12)試劑盒
Human aithrombin III (AT- III) aibody ELISA Kit 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒
Humanlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit 人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforACV-A(HumanActivinA)ELISAKit人活化素A
血液組織蛋白酶B(CATHEPSINB)活性熒光定量試劑盒20次
mouseprolactin,PRLELISAKit小鼠催乳素(PRL)試劑盒
雙特異性磷酸酶5重組兔單克隆抗體
HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原
CSF2RB重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 標簽) Protein
CALCB Protein Human 重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白
BMPR2 Protein Human 重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽)
大鼠牙齦上皮細胞PAX9(Paired box gene 9 0.5mgPAX9(Paired box gene 9) 配對盒基因9抗原
CALCB Protein Human 重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白
HA重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
BMPR2 Protein Human 重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽)
CSF2RB重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (His 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。