| 商品屬性:
組織來源 | 子宮組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7203 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 細(xì)胞介紹:
大鼠子宮頸上皮分離自子宮頸組織;子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,上端與子宮體相連,下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化;宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病,包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題,體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
| 方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮采用先膠原酶消化、后組織貼塊法,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項(xiàng):
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán) 染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常, 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力,請拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后,請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián) 系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠蛋酸酶(PP)試劑盒 ,英文名: PP ELISA Kit
Porcine vascular endothelial cell adhesion molecule 1 (VCAM-1/CD106) ELISA Kit 豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒
病毒通用型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLptn/LTN/XCL1(Humanlymphotactin)ELISAKit人淋巴細(xì)胞趨化因子
通用免疫化學(xué)封閉溶液100毫升
ELISAKitMYO/MB雞肌紅蛋白
血小板衍化生長因子-AB 英文名稱: plateler-derived growth factor AB 英文縮寫: PDGF-AB
血小板衍化生長因子-BB 英文名稱: plateler-derived growth factor BB 英文縮寫: PDGF-BB
程序性死亡因子1 英文名稱: programmed death 1 英文縮寫: PD1
旁分泌的方式分泌血小板源性生長因子受體β 英文名稱: Platelet-derived growth factor receptor beta 英文縮寫: PDGF Rβ
5-三磷酸肌醇受體2抗體
小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai parietal cell aibody (AGPA/PCA) ELISA Kit 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)試劑盒
HumanProteoglycan,PGELISAKit 人蛋白聚糖(PG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA-IgGELISAKit大鼠抗心0脂抗體IgG
耶爾森氏菌屬(Yersinia)鑒定16SrDNAPCR擴(kuò)增試劑盒20次
MouseOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
ZIM3蛋白抗體
CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein
Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)
HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白
CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白
大鼠子宮頸上皮細(xì)胞Connexin-43(Cx43 0.5mgConnexin-43(Cx43) 間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)
CCDC134 Protein Human 重組人 CCDC134 蛋白
CD14重組大鼠 CD14 蛋白 Protein
CLEC6A Protein Mouse 重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白
HNMT重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein