細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠子宮內膜間質分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層剝脫。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養的子宮內膜間質細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠子宮內膜間質采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠子宮內膜間質經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 子宮 | 產品貨號 | YS-01X7936 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠子宮內膜間質體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠催乳素(PRL)試劑盒 ,英文名: PRL ELISA Kit
Porcine tumor necrosis factor alpha (TNF- alpha) ELISA Kit 豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒
ELISA 小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) 進口分裝
CLIAKitforLNELISAKit大鼠層連蛋白/板層素
通用型DNA平滑末端連接克隆試劑盒(包括內切酶)10次
ELISAKitIFN-β/IFNB雞β干擾素
血小板生成素 英文名稱: Thromboietin 英文縮寫: TPO
總蛋白S 英文名稱: total protein S 英文縮寫: TPS
壞死因子相關凋亡誘導配體 英文名稱: tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 英文縮寫: AIL/APO 2L
壞死因子相關凋亡誘導配體受體1 英文名稱: tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand receptor 1 英文縮寫: AIL R1
eIF4A3蛋白抗體
小鼠中性粒細胞趨化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai ypsin (AT) ELISA Kit 人抗(AT)試劑盒
HumanglathioneS-ansferases,GSTpiELISAKit 人硫轉移酶pi基因(GSTpi)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABCG2(HumanATP-bindingcassetteanspoerG2)ELISAKit人腺苷三0酸結合盒轉運體G2
伊紅甲基藍(EMB)革蘭氏陰性細菌選擇瓊脂平板50個
Mouseniicoxidesyhase,NOSELISAKit小鼠合成酶(NOS)試劑盒規格:96T/48T
端粒酶反轉錄酶抗體
PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein
HCV-Core 丙型肝病毒-C區(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(多肽)
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白
大鼠子宮內膜間質細胞HCV-Core 丙型肝病毒-C區(多肽 1mgHCV-Core 丙型肝病毒-C區(多肽)
CCL1 Protein Human 重組人 I-309 / CCL1 / TCA-3 蛋白
PRLR重組大鼠 PRLR / Prolactin receptor 蛋白 Protein
CD6 Protein Mouse 重組小鼠 CD6 / TP120 蛋白
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。