大鼠肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

大鼠肺動脈內(nèi)皮分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行。細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布；該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層多角形鋪路石狀分布，該細(xì)胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細(xì)胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

| 方法簡介：

實驗室分離的大鼠肺動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測：

實驗室分離的大鼠肺動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性：可傳2-3代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠肺動脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

| 注意事項：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均 會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常， 請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請拍下 照片及時和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請將細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用。

| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠葡萄糖60酸異構(gòu)酶(GPI)試劑盒 ，英文名： GPI ELISA Kit

Mouse plasma alpha granule membrane protein (GMP-140) ELISA Kit 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒

Ratai-IVIgGaibodyELISAKit 大鼠抗IVIgG抗體試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGP-II(HumanGlycogenphosphorylaseII)ELISAKit人糖原0酸化酶同工酶II

細(xì)胞蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase4,TIMP-4ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠角化細(xì)胞生長因子（KGF）試劑盒   96T/48T

小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)試劑盒   96T/48T

小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)試劑盒   96T/48T

小鼠膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒   96T/48T

DISC1 C端抗體

小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)試劑盒 96T/48T

Human prealbumin (PA) ELISA Kit 人前白蛋白(PA)試劑盒

Humanmyosinheavychain,MHCELISAKit 人肌球蛋白重鏈(MHC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanadeno-associatedvirus,AAV試劑盒人腺相關(guān)病毒(AAV)試劑盒規(guī)格：96T/48T

直腸標(biāo)記K-ras糞便檢測突變巢式分析試劑盒50次

Mousealpha-L-fucosidase,AFUELISAKit小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規(guī)格：96T/48T

干擾素α8抗體

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

大鼠肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞DISC1(disrupted in schizophrenia1 0.5mgDISC1(disrupted in schizophrenia1)(CT) DISC1 C端抗原

CYB5R1 Protein Human 重組人 CYB5R1 蛋白

SIRPA重組大鼠 SIRP alpha / CD172a 蛋白 Protein

TNFRSF14 Protein Mouse 重組小鼠 HVEM / TNFRSF14 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

GALK1重組人 GALK1 / Galactokinase / Galactose kinase 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein