細胞簡介:
大鼠肺小動脈內皮分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側,至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經左主支氣管前方至左肺門,分兩支進入左肺的上、下葉。右肺動脈較長,橫行向右,經主動脈升部和上腔靜脈的后方達右肺門,分3支進入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實質內又反復分支,與支氣管的分支伴行,后達肺泡壁,形成稠密的毛細血管網。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側與主動脈弓下緣之間有一結締組織索,稱動脈韌帶。管徑在0.3~1mm之間,為小動脈(small-artery),小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內膜有明顯的內彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜。口徑在1mm以下的動脈,管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質纖維。小動脈是決定周圍循環阻力大小的主要因素,也是調節微循環灌注量的“總開關”。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經支配下強力收縮時,其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內,從而增加了周圍血液循環的阻力。如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm;后小動脈(metar-teriole),又稱毛細血管前小動脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm。管壁內均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調節真毛細血管的血流量,是調節微循環灌注量的“分開關”。支配小動脈平滑肌的交感神經纖維,可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細胞。在毛細血管前括約肌上交感神經纖維特別豐富。肺小動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠肺小動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠肺小動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 肺小動脈 | 產品貨號 | YS-01X8226 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠肺小動脈內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠細胞因子信號轉導抑制因子3(SOCS3)試劑盒 ,英文名: SOCS3 ELISA Kit
Mouse pigme epithelium derived factor (PEDF) ELISA Kit 小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)試劑盒
MousesolubleP-selectin,sP-selectinELISAKit 小鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HSV-IIgM單皰疹Ⅰ型病毒IgM(間接法二步法)
細胞INSULI激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLTC4大鼠白三烯C4
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
晚期糖基化終末產物抗體
小鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)試劑盒 96T/48T
Human procollagen C peptidase (PCP) ELISA Kit 人前膠原C端肽酶(PCP)試劑盒
HumansmoothmuscleMyosin,SMMELISAKit 人平滑肌肌球蛋白(SMM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAdenosinediphosphate,ADP試劑盒人二0酸腺苷(ADP)試劑盒規格:96T/48T
直腸標記波形纖維蛋白糞便試劑盒50次
MouseAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒規格:96T/48T
DPS1蛋白抗體
TFPI2重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 (Fc 標簽) Protein
膽囊收縮素(CCK)重組蛋白 Recombinant Cholecystokinin (CCK)
TNFRSF19重組人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 Protein
DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)
CTLA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (Fc 標簽)
大鼠肺小動脈內皮細胞膽囊收縮素(CCK)重組蛋白 Recombinant Cholecystokinin (CCK)
DAPK1 Protein Human 重組人 DAPK1 / DAP Kinase 1 蛋白 (aa 1-363, His & GST 標簽)
TFPI2重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CTLA4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 蛋白 (Fc 標簽)
TNFRSF19重組人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 Protein