細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠脈絡膜黑色素分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用,對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養和遮光作用。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠脈絡膜黑色素先用消化、后-膠原酶混合消化結合專用培養基篩選法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠脈絡膜黑色素經Dopa染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脈絡膜 | 產品貨號 | YS-01X8245 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 長梭形 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:長梭形
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠脈絡膜黑色素體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠細胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)試劑盒 ,英文名: CSE ELISA Kit
Mouse retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 小鼠結合蛋白(RBP)試劑盒
MouseFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISAKit 小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHSP-27(Humanheatshockprotein27)ELISAKit人熱休克蛋白27
細胞MEK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-15大鼠白介素15
小鼠抗中性粒抗體試劑盒 小鼠抗中性粒抗體試劑盒 小鼠抗中性粒抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗中性粒抗體試劑盒、小鼠抗中性粒抗體試劑盒
小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒 小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒、小鼠抗增殖細胞核抗原抗體試劑盒
小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒 小鼠抗血小板抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗血小板抗體試劑盒、小鼠抗血小板抗體試劑盒
小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒 小鼠抗心0脂抗體試劑盒,,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗心0脂抗體試劑盒、小鼠抗心0脂抗體試劑盒
G蛋白結合蛋白7抗體
線粒體核糖體蛋白L40抗體
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
APC(Activated protein C 0.5mgAPC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
CST1 Protein Human 重組人 Cystatin SN / CST1 蛋白
FETUB重組小鼠 Fetuin-B / FETUB 蛋白 Protein
EFNB3 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 蛋白
FGFBP3重組人 FGFBP3 蛋白 Protein
大鼠脈絡膜黑色素細胞小鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA pcr檢測試劑盒
Human caneous lymphocyte associated aigen (CLA) ELISA Kit 人皮膚淋巴細胞相關抗原(CLA)試劑盒
Humangasin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 人胃泌素釋放多肽(GRP)pcr檢測試劑盒分裝
Human6-hydroxydopamine,6-OHDA試劑盒人6-羥多巴胺(6-OHDA)試劑盒規格:96T/48T
正苯基萘胺攝入法細菌膜損傷熒光試劑盒20次
MouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗體(ANA)試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。