細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
人呼吸道上皮分離自呼吸道；呼吸道是肺呼吸時氣流所經過的通道，有肺脊椎動物的呼吸道分上、下兩部：鼻、咽和喉合稱上呼吸道。氣管及其以后一分再分的管道，合稱為下呼吸道，或稱為氣管樹。氣管樹是隨著動物的進化逐漸復雜化的。整個呼吸道內表面都分布有分泌液和纖毛（鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外），它能溫暖（或冷卻）、濕潤和凈化吸入的空氣，對于呼吸器官和機體有著保護作用。呼吸道以骨或軟骨做支架，其內表面覆蓋著黏膜，黏膜內分布著豐富的毛細血管。呼吸道上皮細胞屬于假復層纖毛柱狀上皮，分布于呼吸道的內表面，主要由柱狀，杯形，梭形和錐形等不同形狀細胞組成?？瓷先ハ駨蛯由掀ぃ珜嶋H上所有細胞底部均附于基膜上，屬單層上皮，故稱假復層柱狀上皮，上皮表面有纖毛，杯狀細胞可分泌粘液，包裹著大量細菌，借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
方法簡介：
公司實驗室分離的人呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人呼吸道上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 呼吸道 | 產品貨號 | YS-01X7069 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)試劑盒 ，英文名： FⅧAg ELISA Kit
Porcine hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 豬透明質酸(HA)試劑盒
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforLSP(Humanliverspecificlipoprotein)ELISAKit人抗肝特異性脂蛋白抗體
通用AP酶聯檢測封閉溶液100毫升
ELISAKitIgY雞卵黃免疫球蛋白
小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒 96T/48T
小鼠轉化生長因子α(TGF-α)試劑盒 96T/48T
小鼠主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)試劑盒 96T/48T
小鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ試劑盒 96T/48T
14-3-3 protein ζ/δ抗體
小鼠氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)試劑盒 96T/48T
Eighth factors in rats with associated aigen (F VIII Ag) ELISA Kit 大鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)試劑盒
Humanargininevasopressin,AVPELISAKit 人精加壓素(AVP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor1,5-AG(Human1,5-anhydroglucitol)ELISAKit人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨
飲料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseLactateDehydrogenase,LDHELISAKit小鼠乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒規格：96T/48T
SHISA蛋白家族9抗體
KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein
Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽)
IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
人呼吸道上皮細胞Amylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽 0.5mgAmylin 糖尿病相關肽(胰島淀粉樣肽)
CD22 Protein Human 重組人 Siglec-2 / CD22 蛋白
KIT重組小鼠 c-kit / CD117 蛋白 Protein
IL1RN Protein Rat 重組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 標簽)
IL36G重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
