細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
人脈絡膜黑色素分離自眼球脈絡膜組織;脈絡膜在視網膜和鞏膜之間,含有豐富血管和色素細胞,對外力沖擊的耐受性較視網膜差,當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,圍繞視神經乳頭部有照膜,為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,由纖維組織、小血管和毛細血管組成,軟而薄,棕紅色,在鞏膜和視網膜之間,續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層,其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體,并有遮光作用,使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用,對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方,含豐富的血管和色素細胞,有營養和遮光作用。
方法簡介:
公司實驗室分離的人脈絡膜黑色素用消化、后-膠原酶混合消化結合專用培養基篩選法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人脈絡膜黑色素經Dopa染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脈絡膜組織 | 產品貨號 | YS-01X7692 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 長梭形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細胞形態 長梭形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)試劑盒 ,英文名: DPPⅣ ELISA Kit
Porcine endothelial niic oxide syhase 3 (eNOS-3) ELISA Kit 豬內皮型合成酶3(eNOS-3)試劑盒
鵝特定基因序列(Goose)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforM30(MouseEmbryonicStemMESPU30)ELISAKit小鼠胚胎干細胞系MESPU30
體液誘導型巨噬細胞合成酶(iNOS/NOS2/mNOS)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitAIL-R3雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3
小鼠抑制素A 英文名稱: Insulin A 英文縮寫: Inhibin A
小鼠抑制素B 英文名稱: Insulin B 英文縮寫: Inhibin B
小鼠干擾素誘導蛋白IP-10 英文名稱: induced protein 10 英文縮寫: IP-10
小鼠8異前列腺素 英文名稱: 8-isoprostane F2α 英文縮寫: 8-iso-PG
?磷酸葡萄糖變位酶/?-phosphoglucomutase抗體
小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T
One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒
Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內酰胺酶(β-lactamase)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關X蛋白
熒光穩定/稀釋溶液10毫升
MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)試劑盒規格:96T/48T
NFKB激活蛋白1抗體
IL2RG重組小鼠 IL2RG 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
CK18(Cytokeratin 18 0.5mlCK18(Cytokeratin 18) 細胞角蛋白18抗原(C端)
N6AMT1重組人 N6AMT1 / HEMK2 蛋白 Protein
CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
CD200R1 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標簽)
人脈絡膜黑色素細胞NKB (Neurokinins B 0.5mgNKB (Neurokinins B) 神經激肽B(抗原)
CD3D & CD3E Protein Human 重組人 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
FGF14重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白 Protein
CSF2 Protein Mouse 重組小鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白
PTX3重組人 PTX3 / Pentraxin 3 / TSG-14 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。