| 商品屬性:
組織來源 | 臍帶血 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | YS-01X7117 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 圓形、巨噬細胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
| 細胞介紹:
人臍帶血單核分離自臍帶血;臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細胞,可用于造血干細胞移植,因此,臍帶血已成為造血干細胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細胞,干細胞是生命的種子,它會分化成機體的各種細胞,結(jié)出各種不同的果實——血液細胞、神經(jīng)細胞、骨骼細胞等。干細胞是具有自我更新、高度增殖和多項分化潛能的細胞群體;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量,又可進一步分化為各種組織細胞,從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。血液中的單核細胞來源于骨髓干細胞分化出的髓樣干細胞,是機體防御系統(tǒng)的一個重要組成部分。單核細胞能吞噬異物產(chǎn)生抗體,在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發(fā)生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數(shù)百分比發(fā)生變化,因此,檢查單核細胞計數(shù)成為輔助診斷的一種重要方法。
| 方法簡介:
公司實驗室分離的人臍帶血單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人臍帶血單核經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形、巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
| 細胞培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項:
1. 收到非紅系有核細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問 題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培養(yǎng),待ATCC CRL-1711(Sf9)細 胞匯 合度 80%左右時正常傳代。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠小白蛋白(PVALB)試劑盒 ,英文名: PVALB ELISA Kit
Pla vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 植物B6(VB6)試劑盒
MouseProstaglandinE2,PG-E2ELISAKit 小鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanai-cailage-aibodyELISAKit人抗軟骨抗體
細胞GSK3β激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitLH大鼠促黃體激素
小鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 96T/48T
小鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 96T/48T
小鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒 96T/48T
小鼠血栓素A2(TXA2)試劑盒 96T/48T
嗜乳脂蛋白樣9抗體
小鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human granulocyte chemotactic protein -2 (GCP-2/CXCL6) ELISA Kit 人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)試劑盒
Humandermatansulfate,DSELISAKit 人硫酸皮膚素(DS)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chicken1,3-βDglucosidase,1,3-βD-Glu試劑盒雞1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)試劑盒規(guī)格:96T/48T
遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡同位素試劑盒5次
MouseIgGELISAKit小鼠IgG試劑盒規(guī)格:96T/48T
AF750標(biāo)記的ADCK1蛋白抗體
CTSL1重組人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein
內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)
PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD5L Protein Human 重組人 CD5L / API6 蛋白
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP
人臍帶血單核細胞內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白 Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)
CD5L Protein Human 重組人 CD5L / API6 蛋白
CTSL1重組人 Cathepsin L1 / CTSL1 蛋白 Protein
NP Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP
PILRA重組人 PILR-alpha / PILRA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein