細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
人臍靜脈內皮分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。
方法簡介:
公司實驗室分離的人臍靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人臍靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 臍帶組織 | 產品貨號 | YS-01X7292 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠葡萄糖60酸脫氫酶(G6PD)試劑盒 ,英文名: G6PD ELISA Kit
Mouse serum amyloid A (SAA) ELISA Kit 小鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)試劑盒
Ratai-IgEreceptoraibodyELISAKit 大鼠抗IgE受體抗體試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGP-IIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II
細胞低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續循環比色法定量試劑盒20次
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase3,TIMP-3ELISAKit大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒規格:96T/48T
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
DNA甲基轉移酶相關蛋白1抗體
小鼠型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human calf iestinal alkaline phosphatase (CIAP) ELISA Kit 人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)試劑盒
HumanHydroxyproline-RichGlycoprotein,HRGPELISAKit 人羥脯糖蛋白(HRGP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human26Sproteasome,26SPSM試劑盒人26S蛋白酶體(26SPSM)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次
Mouseapelin12,AP12ELISAKit小鼠apelin12(AP12)試劑盒規格:96T/48T
干細胞生長因子SCGF抗體
FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽) Protein
Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1
CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白
ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白
人臍靜脈內皮細胞Mast Cell Chymase 肥大細胞類1 0.5mgMast Cell Chymase 肥大細胞類1
CSNK2A2 Protein Human 重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白
FGFR1重組食蟹猴 FGFR1 / CD331 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ENPEP Protein Mouse 重組小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白
CALML5重組人 CALML5 / CLSP 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。