細(xì)胞簡介：
人髂動脈內(nèi)皮分離自髂動脈組織；髂總動脈位于人體的盆腔，人的髂總動脈有兩條，也就是臨床上左右兩條分支，它是由腹部主要的動脈演化而來，由腹部的腹主動脈沿著人體的脊柱方向向下進(jìn)行，到達(dá)第4腰椎后開始分成兩支，這就是左右髂總動脈。動脈是介于心室與毛細(xì)血管之間的管道，它接近心室的部分，管徑大，管壁較厚。經(jīng)過反復(fù)分支，管徑逐漸變小，管壁變薄，后形成與毛細(xì)血管構(gòu)造相似的毛細(xì)血管前小動脈，與毛細(xì)血管相接。動脈的管徑大小和管壁的厚薄，雖相差很大，但構(gòu)造上均有共同之處。一般均由3層膜組成，內(nèi)層稱為內(nèi)膜，由內(nèi)皮及縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成；中間的一層稱為中膜，由環(huán)形排列的組織構(gòu)成；外的一層叫外膜，由縱行排列的結(jié)締組織構(gòu)成。動脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動脈內(nèi)面的單層細(xì)胞，可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài)，當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此，動脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物缺少的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。
方法簡介：
公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人髂動脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 髂動脈 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7309 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠鈣非依賴型0脂酶A2(iPLA2)試劑盒 ，英文名： iPLA2 ELISA Kit
Pig two amine oxidase (DAO) ELISA Kit 豬氧化酶(DAO)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCAb(Humanmelanocyteaibody)ELISAKit人黑色素細(xì)胞抗體
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitβ-EP馬β內(nèi)啡肽
小鼠血管性血友病因子 英文名稱： von Willebrand Factor 英文縮寫： VWF
蠶多巴胺 英文名稱： Bombyx Dopamine 英文縮寫： DPA
英文名稱： Total Niic Oxide 英文縮寫： NO
骨橋素/骨橋蛋白 英文名稱： Osteopoin 英文縮寫： OPN
LIM結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 大鼠高遷移率族蛋白1(HMG-1)試劑盒
Humanadenosinedeaminase,ADAELISAKit 人腺苷脫氨酶(ADA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickencarbonicanhydrase,CA試劑盒雞酶(CA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-10蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)試劑盒規(guī)格：96T/48T
FAM205A蛋白抗體
BST2重組小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
半乳糖凝集素8(GAL8)重組蛋白 Recombinant Galectin 8 (GAL8)
IL22重組人 IL22 / IL-22 / Interleukin 22 蛋白 Protein
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人髂動脈內(nèi)皮細(xì)胞AM (Adrenomedullin; ADM 0.1mgAM (Adrenomedullin; ADM) 腎上腺髓質(zhì)素(多肽抗原)
CD82 Protein Human 重組人 CD82 / KAI-1 蛋白
SLAMF6重組小鼠 SLAMF6 / Ly108 蛋白 Protein
TLR2 Protein Rat 重組大鼠 TLR2 蛋白
ENPP5重組人 ENPP5 蛋白 Protein
