細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
人真皮成纖維分離自真皮組織；真皮，位于表皮深層，向下與皮下組織相連，真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起，埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維，使皮膚既有彈性，又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括：構造和維持組織的正常形態，合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
方法簡介：
公司實驗室分離的人真皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人真皮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 皮膚組織 | 產品貨號 | YS-01X7340 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
大鼠極低密度脂蛋白受體(VLDLR)試劑盒 ，英文名： VLDLR ELISA Kit
Mouse tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 1 (AIL-R1) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(AIL-R1)試劑盒
RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 大鼠骨保護素配體(OPGL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFDPELISAKit大鼠血纖蛋白原降解產物
細胞基質金屬蛋白酶(MMP-3)活性熒光定量試劑盒20次
ratNoradrenaline,NAELISAKit大鼠去甲(NA)試劑盒規格：96T/48T
小鼠絨毛膜β(β-CG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠性激素結合球蛋白(SHBG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠脫氫表雄S7(DHEA-S7)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠脫氫表雄(DHEA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
AF750標記的促腎上腺皮質激素受體
小鼠生長調節致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin G receptor Fc section III (Fc gamma R III /CD16) ELISA Kit G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)試劑盒
Humanmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 人髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
EquineImmunoglobulinE,IgE試劑盒馬免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規格：96T/48T
真菌/酵母β-(β-AMYLASE)活性DNS比色法定量試劑盒20次
MouseCoisolELISAKit小鼠(Coisol)試劑盒規格：96T/48T
熱休克蛋白71抗體
NOV重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein
IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長因子結合蛋白-2(多肽)
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽) Protein
CNPY2 Protein Human 重組人 CNPY2 蛋白
CHODL Protein Mouse 重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白
人真皮成纖維細胞IGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2 0.5mgIGFBP-2 (Insulin-like Growth Factor Binding Protein 2) 胰島素樣生長因子結合蛋白-2(多肽)
CNPY2 Protein Human 重組人 CNPY2 蛋白
NOV重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白 Protein
CHODL Protein Mouse 重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白
CCL8重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
