細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
人直腸癌組織源分離自癌組織;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,是惡性腫瘤中常見的一類。相對應的,起源于間葉組織的惡性腫瘤統稱為肉瘤。有少數惡性腫瘤不按上述原則命名,如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說的“癌癥”習慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細胞分化和增殖異常、生長失去控制、浸潤性和轉移性等生物學特征,其發生是一個多因子、多步驟的復雜過程,分為致癌、促癌、演進三個過程,與吸煙、感染、職業暴露、環境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關。癌細胞,是一種變異的細胞,是產生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同,有無限增殖、可轉化和易轉移三大特點,能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織。癌細胞除了分裂失控外(能進行多極分裂),還會局部侵入周圍正常組織甚至經由體內循環系統或淋巴系統轉移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
方法簡介:
公司實驗室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的人直腸癌組織源經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 直腸癌組織 | 產品貨號 | YS-01X7470 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠基質金屬蛋白酶9(MMP9)試劑盒 ,英文名: MMP9 ELISA Kit
Mouse ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 小鼠轉化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒
Ratα-glathioneS-ansferases,α-GSTELISAKit 大鼠αS轉移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFAS/CD95ELISAKit大鼠凋亡相關因子
細胞甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次
RatN-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAGELISAKit大鼠N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)試劑盒規格:96T/48T
小鼠趨化因子(mouse RAES) 作用: ELISA
小鼠抵抗素(mouse Resistin) 作用: ELISA
小鼠可溶性破骨細胞異化因子(mouse sRANKL) 作用: ELISA
小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA) 作用: ELISA
ARCH抗體
小鼠神經營養因子3(-3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human immunoglobulin heavy chain (IgH) ELISA Kit 重鏈(IgH)試劑盒
HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 人肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Fishi-iodothyronine,T3試劑盒魚類三甲狀腺原(T3)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母非蛋白/游離巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒規格:96T/48T
溶質載體家族蛋白20成員A1抗體
NA重組甲型流感 H3N2 神經酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
PSCA 前列腺干細胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細胞抗原
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標簽)
人直腸癌組織源細胞PSCA 前列腺干細胞抗原 0.5mgPSCA 前列腺干細胞抗原
COASY Protein Human 重組人 COASY / CoA synthase 蛋白
NA重組甲型流感 H3N2 神經酶 (Neuraminidase / NA) (E119V mutation) (高活性) Protein
EPHB6 Protein Human 重組人 EphB6 / EphB6 蛋白 (Fc 標簽)
NOG重組人 Noggin / NOG 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。