細胞傳代步驟：
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介：
人椎間盤髓核分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質；周圍部的纖維環，由多層纖維軟骨環按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環一起將髓核密封起來。纖維環由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結構的一部分，位于兩軟骨板與纖維環之間。由縱橫交錯的纖維網狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構成髓核的主要物質是大量蛋白多糖復合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。
方法簡介：
公司實驗室分離的人椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的人椎間盤髓核經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 椎間盤組織 | 產品貨號 | YS-01X7328 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品：
大鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)試劑盒 ，英文名： CKMB ELISA Kit
Mouse tissue polypeptide aigen (TPA) ELISA Kit 小鼠組織多肽抗原(TPA)試劑盒
RatCalretinin,CRELISAKit 大鼠鈣結合蛋白(CR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFVIIIAg(MouseFactorVIII-relatedAigen)ELISAKit小鼠第八因子相關抗原
細胞抗壞血酸比色法定量試劑盒20次
Ratmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP-1/MCAFELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒規格：96T/48T
小鼠前列腺素E2 英文名稱： prostaglandin E2 英文縮寫： PGE2
小鼠分泌型0脂酶A2 英文名稱： secretary phospholipase A2 英文縮寫： sPLA2
小鼠多效生長因子 英文名稱： Pleioophin 英文縮寫： PTN
小鼠抑癌基因P53蛋白 英文名稱： aioncogene p53 protein 英文縮寫： P53
CD73單克隆抗體
小鼠神經降壓肽()試劑盒 96T/48T
Human membrane attack complex (MAC) ELISA Kit 人膜攻擊復合物(MAC)試劑盒
HumanHighdensitylipoproteincholesterol,HDL-CELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GoatGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRP試劑盒山羊生長激素釋放多肽(GHRP)試劑盒規格：96T/48T
真菌/酵母堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法定量試劑盒20次
MousecoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit小鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒規格：96T/48T
神經遷移蛋白Slit2/3抗體
MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原
WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein
COL4A3BP Protein Human 重組人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 標簽)
SPN Protein Mouse 重組小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 標簽)
人椎間盤髓核細胞IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha 0.5mgIKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原
COL4A3BP Protein Human 重組人 COL4A3BP 蛋白 (His & GST 標簽)
MET重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SPN Protein Mouse 重組小鼠 SPN / CD43 蛋白 (Fc 標簽)
WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
