細胞簡介:
兔成骨分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌蛋白酶消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔成骨經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 顱骨組織 | 產品貨號 | YS-01X7212 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠鹽皮質激素受體(MR)試劑盒 ,英文名: MR ELISA Kit
Mouse thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 小鼠抗復合物(TAT)試劑盒
MouseEndocrineglandvascularendothelialgrowthfactor,EG-VEGFELISAKit 小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanComplemefragme3a,C3aELISAKit人補體片斷3a
細胞CASEINKINASE1δ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitOFQ/N大鼠孤腓肽
小鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒 96T/48T
小鼠內皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T
小鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)試劑盒 96T/48T
小鼠內毒素(ET)試劑盒 96T/48T
內皮細胞清道夫受體抗體
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human mucosal addressin cell adhesion molecule (MAdCAM-1) ELISA Kit 人黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM-1)試劑盒
HumancytokeratinLowMolecularWeight,CK-LMWELISAKit 人低分子量細胞角蛋白(CK-LMW)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Guineapigierleukin4,IL-4試劑盒豚鼠白介素4(IL-4)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性化學發光法定量試劑盒20次
Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISAKit小鼠酶2(CA-2)試劑盒規格:96T/48T
腫瘤蛋白P73抗體
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
天冬轉氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
兔成骨細胞天冬轉氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)
CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白
MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein