細胞簡介:
兔肺動脈成纖維分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺動脈的正常形態(tài);合成和釋放細胞外基質;組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔肺動脈成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔肺動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 肺動脈組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7048 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠載脂蛋白A1(APOA1)試劑盒 ,英文名: APOA1 ELISA Kit
Mouse thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒
MouseMacrophageInflammatoryProtein1β,MIP-1βELISAkit 小鼠巨噬細胞性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforhumanexcisioepaircross-complemeationgroup1,ERCC1ELISAkit人切除修復交叉互補基因1
細胞/組織明膠載玻片制備試劑盒20次
ELISAKitMMP-1大鼠基質金屬蛋白酶1
小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒、小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠腦紅蛋白試劑盒 小鼠腦紅蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠腦紅蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠腦紅蛋白試劑盒、小鼠腦紅蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠腦腸肽試劑盒 小鼠腦腸肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠腦腸肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠腦腸肽試劑盒、小鼠腦腸肽試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠免疫球蛋白試劑盒 小鼠免疫球蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠免疫球蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠免疫球蛋白試劑盒、小鼠免疫球蛋白試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
磷酸化Bcl-xL蛋白抗體
小鼠熱休克蛋白47(HSP47)試劑盒 96T/48T
Human ornithine decarboxylase (ODC) ELISA Kit 人鳥脫羧酶(ODC)試劑盒
HumanLungresistance-relatedprotein,LRPELISAKit 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigiestinalfattyacidbindingprotein,iFABP試劑盒豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒20次
Mousecalciumchannelblockers,CCBELISAKit小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)試劑盒規(guī)格:96T/48T
鋅指蛋白樣1抗體
PPIL2重組人 PPIL2 蛋白 (aa 280-457, His 標簽) Protein
Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3 0.5mgSocs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗原
B4GALT1重組人 B4GALT1 / GGTB2 蛋白 Protein
CPVL Protein Human 重組人 CPVL / Carboxypeptidase 蛋白
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標簽)
兔肺動脈成纖維細胞Socs 3 (suppressor of cytokine signaling 3 0.5mgSocs 3 (suppressor of cytokine signaling 3) 細胞因子信號傳導抑制蛋白3抗原
CPVL Protein Human 重組人 CPVL / Carboxypeptidase 蛋白
PPIL2重組人 PPIL2 蛋白 (aa 280-457, His 標簽) Protein
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標簽)
B4GALT1重組人 B4GALT1 / GGTB2 蛋白 Protein