兔腹腔巨噬細(xì)胞

| 商品屬性：

| 細(xì)胞介紹：

兔腹腔巨噬分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能，是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點(diǎn)問題之一；腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。

| 方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

| 質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

| 培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 公司正在出售的產(chǎn)品

大鼠神經(jīng)元衍生孤兒受體1(NOR1)試劑盒 ，英文名： NOR1 ELISA Kit

Mouse surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒

Ratacetylcholine,ACHELISAKit 大鼠乙酰(Ach)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHBsAb(Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody)ELISAKit人抗乙型肝病毒表面抗體

細(xì)胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次

SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子CD8+   英文名稱：   Mouse Cluster of Differeiation 8+   英文縮寫：   CD8+

小鼠免疫細(xì)胞表面抗原分子8   英文名稱：   Mouse Cluster Of Differeiation 8   英文縮寫：   CD8+

小鼠1型膠原   英文名稱：   Mouse Collagen Type 1   英文縮寫：   C1

小鼠3型膠原   英文名稱：   Mouse Collagen Type 3   英文縮寫：   C3

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2重組兔單克隆抗體

小鼠去甲(NE)試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

白細(xì)胞分化抗原CD207抗體

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

兔腹腔巨噬細(xì)胞MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)

CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白

CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽) Protein

| 注意事項(xiàng)：

1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。

4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度  80%左右時(shí)正常傳代。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7.該細(xì)胞僅供科研使用