細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔睪丸間質分離自睪丸組織;睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質呈嗜酸性,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1-2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,無分泌顆粒。從青春期開始,睪丸間質細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質細胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進的發生和男性生殖器官發育,以及維持性征和性功能。
方法簡介:
實驗室分離的兔睪丸間質采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔睪丸間質經3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 睪丸 | 產品貨號 | YS-01X7879 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔睪丸間質體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
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晶狀體球蛋白γ3/γC-crystallin/白內障相關蛋白抗體
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T
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線粒體核糖體蛋白S15抗體
ROBO4重組小鼠 ROBO4 蛋白 Protein
白介素5(IL5)重組蛋白 Recombinant Interleukin 5 (IL5)
GABARAPL2重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 Protein
CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白
CD4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD4 蛋白
兔睪丸間質細胞白介素5(IL5)重組蛋白 Recombinant Interleukin 5 (IL5)
CSF1 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 蛋白
ROBO4重組小鼠 ROBO4 蛋白 Protein
CD4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD4 蛋白
GABARAPL2重組人 GATE-16 / GABARAPL2 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。