細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔關節軟骨分離自關節軟骨組織;關節軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節面,這種結構使關節軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節軟骨的正常代謝。關節軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養成分必須從關節液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節液中,關節軟骨的這種營養代謝必須通過關節運動,使關節軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節運動對于維持關節軟骨的正常結構起重要的作用。關節軟骨細胞位于關節軟骨陷窩內。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節軟骨表面平行,越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內,這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的兔關節軟骨采用膠原酶聯合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的兔關節軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 關節軟骨組織 | 產品貨號 | YS-01X7003 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白介素32(IL-32)試劑盒 ,英文名: IL-32 ELISA Kit
Mouse soluble ierleukin 2 receptor alpha chain (IL-2sR alpha /CD25) ELISA Kit 小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性細胞間粘附分子-1 (mouse sICAM-1) 進口分裝
CLIAKitforInhbb(Humaninhibinbeta-B)ELISAKit人抑制素β-B
通用型柑桔枯萎病茍養木桿菌(Xylellafastidiosa;Xf)試劑盒20次
ELISAKitFFA大鼠游離脂肪酸
小鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠紅細胞生成素(EPO)ELISAKit ELISA. 96T/48T
AF750標記的微管蛋白抗體
小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor II (F II) ELISA Kit 人Ⅱ(FⅡ)試劑盒
Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit 人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AG試劑盒人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞線粒體分離(高)試劑盒10次
MouseAquaporin5,AQP-5ELISAKit小鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒規格:96T/48T
硫酸乙酰肝素6腦苷脂轉硫酸酶1抗體
BMPR2重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
巨噬細胞移動抑制因子(MIF)重組蛋白 Recombinant Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)
GFER重組人 GFER / ALR 蛋白 Protein
CSF2RB Protein Human 重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白
HA Protein H7N3 重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
兔關節軟骨細胞巨噬細胞移動抑制因子(MIF)重組蛋白 Recombinant Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF)
CSF2RB Protein Human 重組人 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白
BMPR2重組人 BMPR2 / BMPR-II 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
HA Protein H7N3 重組甲型流感 H7N3 (A/turkey/Italy/214845/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
GFER重組人 GFER / ALR 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。