| 商品屬性：
組織來源 | 結(jié)腸 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7973 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
| 細(xì)胞介紹：
兔結(jié)腸成纖維分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M”，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑肌），外膜（纖維膜或漿膜）。結(jié)腸成纖維細(xì)胞主要分布于外膜（纖維膜或漿膜）結(jié)締組織內(nèi)。成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的結(jié)腸成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
| 方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔結(jié)腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
| 質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔結(jié)腸成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
| 培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔結(jié)腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
| 細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO，輕輕混勻，DMSO 終濃度為 10%，細(xì)胞密度不低于1x106/ml，每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液，注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80 度冰箱，2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
| 注意事項(xiàng)：
1. 收到非紅系有核細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn) 象發(fā)生請(qǐng)及 時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所 需細(xì)胞因子 等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件*。若由于培養(yǎng)條件不*而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問 題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量 從瓶 壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng) 4~6 小時(shí),再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均 會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán) 染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常， 請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活 力，請(qǐng)拍下 照片及時(shí)和我們聯(lián)系，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 靜置細(xì)胞貼壁后，請(qǐng)將細(xì)胞瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基倒出，留 6~8mL 維持細(xì)胞正常培養(yǎng)，待ATCC CRL-1711(Sf9)細(xì) 胞匯 合度 80%左右時(shí)正常傳代。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞 傳代時(shí)可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和 技術(shù) 部 溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián) 系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們 的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7.該細(xì)胞僅供科研使用。
| 公司正在出售的產(chǎn)品
大鼠血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)試劑盒 ，英文名： ANGPTL2 ELISA Kit
Mouse prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 小鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒
Mouseangiopoietieceptoie1,ANG-R-Tie1ELISAkit 小鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCA724ELISAKit人腫瘤標(biāo)志物
細(xì)胞C-TAK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitM-AChR大鼠受體
小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體
小鼠腦啡肽(ENK)試劑盒 96T 試劑盒 組裝/原裝
Rat thyroxine aibody (TAb) ELISA Kit 大鼠甲狀腺素抗體(TAb)試劑盒
HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化類胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human5-lipoxygenase,5-LO/LOX試劑盒人5脂加氧酶(5-LO/LOX)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌格莫瑞(Gomori'sMethenamineSilver;GMS)銀染試劑盒50次
Mouseai-redcellaibodyELISAKit小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
自噬相關(guān)蛋白3抗體
NRP2重組人 Neuropilin-2 / NRP2 蛋白 Protein
微管關(guān)聯(lián)蛋白1A(MAP1A)重組蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)
CDNF重組人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
兔結(jié)腸成纖維細(xì)胞微管關(guān)聯(lián)蛋白1A(MAP1A)重組蛋白 Recombinant Microtubule Associated Protein 1A (MAP1A)
CTLA4 Protein Human 重組人 CTLA4 / CD152 蛋白
NRP2重組人 Neuropilin-2 / NRP2 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
CDNF重組人 CDNF / ARMETL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
