細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔胚胎肢芽間充質干分離自胚胎肢芽;胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數脊椎動物胚胎中,在四肢發生的初期階段,在身體兩側有呈芽狀的突起,內部是中胚層側板的體壁板垱厚形成,表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區肢芽迅速伸長,不久,在其前端即見有指的突起。在此時期間,其內部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織,在將肢芽作分離培養的時候也可以獲得。根據對兩棲類的有尾類的研究,作為肢原基各部的胚發能力,肢芽物質的大部分是位于背半部,而前半部主要參與基部形成,后半部參與前端的形成。在實驗上,即使將肢的原基分成二半,每一半調整好都可形成基本上近于正常形態的肢體,而且肢體各軸的極性和側性也逐漸決定。間充質干細胞(MSC)是屬于中胚層的一類多能干細胞,主要存在于結締組織和器官間質中,是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞;這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數量,并在特定條件下轉變成為一種或多種構成機體組織或器官的細胞,從而在組織修復等方面發揮積極作用。
方法簡介:
實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質干采用-膠原酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 胚胎: | 產品貨號 | YS-01X8407 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胚胎肢芽間充質干體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠組胺H3受體(HRH3)試劑盒 ,英文名: HRH3 ELISA Kit
Mouse ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 小鼠抗抗體(AsAb)試劑盒
Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdGELISAKit 小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforHumanlymphocytefactorELISAKit人淋巴細胞因子
土壤(lithium)化學比色法定量試劑盒50次
ELISAKitdsDNA大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體
兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISAKit ELISA
兔(NO)ELISAKit ELISA
兔補體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA
兔p物質(SP)ELISAKit ELISA
生長因子受體結合蛋白10抗體
干擾素/維甲酸誘導凋亡相關基因抗體
SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原
SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白
CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原 0.5mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/轉化生長因子β受體抗原
HAGH Protein Human 重組人 HAGH / GLO2 / Glyoxalase II 蛋白
SERPIND1重組小鼠 SerpinD1 / HCII 蛋白 Protein
IL7 Protein Rat 重組大鼠 IL7 / interleukin 7 蛋白
SRC重組人 SRC Kinase / Proto-oncogene c-Src 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
兔胚胎肢芽間充質干細胞小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盤蛋白(PP)pcr檢測試劑盒分裝
HumancicaicialPemphigoid,CP試劑盒人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)試劑盒規格:96T/48T
組(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取