細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡介：
兔心臟微血管周分離自心臟組織；心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來大量研究表明，心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介：
實驗室分離的兔心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 心臟 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8457 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 ，英文名： iFABP ELISA Kit
Mouse FMS like tyrosine kinase 3 ligand (Flt3L) ELISA Kit 小鼠FMS樣酪激酶3配體(Flt3L)試劑盒
ELISA 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF) 分裝
CLIAKitforLDLELISAKit大鼠低密度脂蛋白
通用型N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKiths-CRP猴超敏C反應(yīng)蛋白
蝦胺/酚乙醇胺 英文名稱： Octopamine 英文縮寫： OPM
河蟹5羥色胺 英文名稱： 5-Hydroxyyptamine 英文縮寫： 5-HT
鱸魚 英文名稱： Coisol 英文縮寫： CO
鱸魚/胞壁質(zhì)酶 英文名稱： Lysozyme /Muramidase 英文縮寫： Lysozyme
環(huán)指蛋白113B抗體
PAP1結(jié)合蛋白抗體
ART4重組小鼠 Art4 / CD297 蛋白 Protein
促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標(biāo)簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)
IFNGR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 蛋白
Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta 0.5mgActin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽)
ENPP2重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ALCAM Protein Rat 重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ANTXR1重組人 ANTXR1 蛋白 Protein
兔心臟微血管周細(xì)胞小鼠多瘤病毒(POLY)試劑盒
Rayon, hemagglinin (FHA) ELISA Kit 人絲狀血球凝集素(FHA)試劑盒
RatplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒分裝
HumanAquaporin1,AQP-1試劑盒人水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
植物乙酰乙酰轉(zhuǎn)移酶(ACAT)活性比色法定量試劑盒20次
Humaissuefactor，IFELISAKit人組織因子(TF)試劑盒
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取
