細胞簡介:
兔陰莖白膜成纖維分離自陰莖白膜組織;海綿體,又稱海綿體肌,是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的陰莖白膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。陰莖白膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程?,F在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。
方法簡介:
實驗室分離的兔陰莖白膜成纖維采用膠原酶-聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔陰莖白膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 陰莖 | 產品貨號 | YS-01X8476 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔陰莖白膜成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠鈣調素依賴性蛋白激酶2(CAMK2)試劑盒 ,英文名: CAMK2 ELISA Kit
Porcine gasin receptor (GsaR) ELISA Kit 豬促胃液素受體(GsaR)試劑盒
轉基因植物PAT基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMCP-3/CCL7ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白3
體液腺苷酸環化酶(AdenylateCyclase)活性酶連續循環比色法定量試劑盒20次
ELISAKitCBH貓漢賽巴通體
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒
小鼠孕激素/孕(PROG)試劑盒
小鼠誘導型合成酶(iNOS)試劑盒
小鼠游離脂肪酸(FFA)試劑盒
DNAJC19蛋白抗體
G蛋白修補結構域蛋白1抗體
MMP8重組小鼠 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a 0.5mgAgtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
ERP27重組人 ERP27 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CD300A Protein Human 重組人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 蛋白
EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白
Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a 0.5mgAgtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
CD300A Protein Human 重組人 CD300A / CMRF-35H / IGSF12 蛋白
MMP8重組小鼠 MMP-8 / CLG1 蛋白 Protein
EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白
ERP27重組人 ERP27 蛋白 (Fc 標簽) Protein
兔陰莖白膜成纖維細胞小鼠血小板生成素(TPO)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat factor related apoptosis inducing ligand (FASL) ELISA Kit 大鼠凋亡相關因子配體(FASL)試劑盒
Humanα2-plasmininhititor,α2-PIELISAKit 人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitfor(MousemammarycarcinomaMarker-CA153)ELISAKit小鼠癌標志物-CA153
飲料乙酸比色法定量試劑盒20次
Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒規格:96T/48T