細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
兔子宮頸上皮分離自子宮頸組織;子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,上端與子宮體相連,下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,其上端通過宮頸內口與子宮腔相連,其下端通過宮頸外口開口于陰道。內外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內分泌狀態等而變化;宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病,包括胚胎發育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題,體外培養的子宮頸上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的兔子宮頸上皮采用膠原酶消化法,結合上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的tu子宮頸上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 子宮 | 產品貨號 | YS-01X8485 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔子宮頸上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠雌一醇(E1)試劑盒 ,英文名: E1 ELISA Kit
Mouse 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 小鼠25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒
ELISA 小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF) 分裝
CLIAKitforLHELISAKit大鼠促黃體激素
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitADM腎上腺髓質素
鐵測試盒 Iron test case
錳測試盒 Manganese test case
鎳測試盒 Nickel test case
鹽快速測試盒 Niate rapid test case
富含脯突觸相關蛋白SHANK1抗體
GRWD1蛋白抗體
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein
兔子宮頸上皮細胞小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)pcr檢測試劑盒
Human Pro gasin releasing peptide (ProGRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒
HumanPeosidineELISAKit 人戊糖素(Peosidine)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCoxsackievirusIgM,CoxV-IgM試劑盒人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)試劑盒規格:96T/48T
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)試劑盒規格:96T/48T
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取