細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠成骨分離自顱骨組織;顱骨位于脊柱上方,由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規則骨組成。除下頜骨及舌骨外,其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結,起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部,內有顱腔,容納腦,共8塊。面顱為顱的前下部分,包含眶、鼻腔、口腔等結構,構成面部的支架,共15塊。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞,負責骨基質的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建,骨重建過程包括破骨細胞貼附在舊骨區域,分泌酸性物質溶解礦物質,分泌蛋白酶消化骨基質,形成骨吸收陷窩;其后,成骨細胞移行至被吸收部位,分泌骨基質,骨基質礦化而形成新骨;破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關鍵。成骨細胞培養不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統疾病的分子和細胞學基礎,也是藥物篩選、生物材料開發和生物工程研究的重要手段。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠成骨經ALP染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 顱骨組織 | 產品貨號 | YS-01X7315 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)試劑盒 ,英文名: IL-2sRβ ELISA Kit
Mouse ierleukin 4 (IL-4) ELISA Kit 小鼠白介素4(IL-4)試劑盒
ELISA 小鼠類胰島素生長因子-1(mouse IGF-1) 進口分裝
CLIAKitforINH-A(HumanInhibin)ELISAKit人抑制素A
通用型元素熒光定量試劑盒20次
ELISAKitF-TESTO大鼠游離睪同
小鼠白三烯試劑盒 小鼠白三烯試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠白三烯試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠白三烯試劑盒、小鼠白三烯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠白介素2受體試劑盒 小鼠白介素2受體試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠白介素2受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠白介素2受體試劑盒、小鼠白介素2受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒 小鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠白介素1受體拮抗劑試劑盒、小鼠白介素1受體拮抗劑eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠白細胞介素試劑盒 小鼠白細胞介素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠白細胞介素試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠白細胞介素試劑盒、小鼠白細胞介素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
ARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體
小鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit 人神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒
Humaniegrinβ2ELISAKit 人β2整合素(iegrinβ2/CD11+CD18)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAb試劑盒人抗乙型肝病毒表面抗體(HBsAb)試劑盒規格:96T/48T
植物0脂酶D(PhospholipaseD)總活性熒光定量試劑盒20次
Humanvasopeptidaseinhibitors,VPIELISAKit人血管活性肽酶抑制劑(VPI)試劑盒規格:96T/48T
球蛋白重鏈可變區抗體
IL10RB重組大鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
FUCA1/Alpha L fucosidase I peptide α-L巖藻糖苷酶抗原 0.5mgFUCA1/Alpha L fucosidase I peptide α-L巖藻糖苷酶抗原
SOD2重組人 SOD2 / Mn-SOD 蛋白 Protein
EPHA7 Protein Human 重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 (His & GST 標簽)
FZD10 Protein Mouse 重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白
小鼠成骨細胞FUCA1/Alpha L fucosidase I peptide α-L巖藻糖苷酶抗原 0.5mgFUCA1/Alpha L fucosidase I peptide α-L巖藻糖苷酶抗原
EPHA7 Protein Human 重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 (His & GST 標簽)
IL10RB重組大鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
FZD10 Protein Mouse 重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白
SOD2重組人 SOD2 / Mn-SOD 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取