細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠滑膜間充質干分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關節腔內面的內襯結構,各種關節內疾病均會累及滑膜。而滑膜細胞是維持關節正常功能的重要組織結構,同時在各種關節疾患中也是主要病變部位。骨關節炎(OA)以關節軟骨退行性變為特征,其病理改變累及關節的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關節的退變。滑膜細胞是構成滑膜層的大細胞群體,是維持關節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無定性的基質中,基質內有分散的纖維分布。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產生潤滑液成分,并且與關節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關;②滑膜細胞增生,表現為不依賴于支持物生長,并且分泌大量的效應分子來促進炎癥和關節損壞;③是自身自分泌和旁分泌網絡中效應因子的一部分。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠滑膜間充質干采用膠原酶消化法和低密度接種法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠滑膜間充質干經CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 滑膜組織 | 產品貨號 | YS-01X7684 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠雄激素受體(AR)試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit
Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)試劑盒
MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠組織因子(TF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹傷寒抗體
細胞ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠單核細胞趨化蛋白1
小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)試劑盒 96T/48T
小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)試劑盒 96T/48T
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)試劑盒 96T/48T
神經膠質生長因子/神經調節蛋白β抗體
小鼠骨保護素配體(OPGL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit 人(PK)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCA試劑盒人抗釀酒酵母抗體(ASCA)試劑盒規格:96T/48T
植物細胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humanypsinogen-2,y-ⅡELISAKit人原Ⅱ(y-Ⅱ)試劑盒規格:96T/48T
5號染色體開放閱讀框54抗體
POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)
XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein
FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白
CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白
小鼠滑膜間充質干細胞Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)
FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白
POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白
XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取