細胞簡介:
小鼠脊髓成纖維分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經結構,位于脊柱的椎管內且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經系統延伸部分。中樞神經系統的細胞依靠復雜的聯系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經信息。人和脊椎動物中樞神經系統的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發出成對的神經,分布到四肢、體壁和內臟。脊髓的內部有一個H形(蝴蝶型)灰質區,主要由神經細胞構成;在灰質區周圍為白質區,主要由有髓神經纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發出許多成對的神經(稱為脊神經)分布到全身皮膚、肌肉和內臟器官。脊髓是周圍神經與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經的出入可把脊髓也分為相應的31節,31對脊神經就是由不同的脊椎發出的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來;成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態;合成和釋放細胞外基質;組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠脊髓成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脊髓組織 | 產品貨號 | YS-01X7497 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠細胞間粘附分子1(ICAM1)試劑盒 ,英文名: ICAM1 ELISA Kit
Mouse growth factor (GH) ELISA Kit 小鼠生長因子(GH)試劑盒
Mousep53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 小鼠p53(p53)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHSP-40ELISAKit大鼠熱休克蛋白40
細胞MAPKAPKINASE5激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-16大鼠白介素16
小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)試劑盒 96T/48T
小鼠CD8分子(CD8)試劑盒 96T/48T
小鼠CD163分子(CD163)試劑盒 96T/48T
小鼠B因子(BF)試劑盒 96T/48T
線粒體RNA聚合酶抗體
小鼠孤腓肽(OFQ/N)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human chromogranin A (CgA) ELISA Kit 人嗜鉻蛋白A(CgA)試劑盒
Humaoll-likereceptor9,TLR-9ELISAkit 人Toll樣受體9(TLR-9/CD289)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-Survivinaibody,Surv試劑盒人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)試劑盒規格:96T/48T
植物纖維素酶(cellulase)活性熒光定量試劑盒20次
Humaniple-helicalpeptide,THPELISAKit人螺旋肽(THP)試劑盒規格:96T/48T
GTP酶激活蛋白ASAP3抗體
THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein
信號素3F(SEMA3F)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3F (SEMA3F)
OBP2B重組人 OBP2B / Odorant-binding protein 2b 蛋白 Protein
FCGR1 Protein Human 重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽)
小鼠脊髓成纖維細胞信號素3F(SEMA3F)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3F (SEMA3F)
FCGR1 Protein Human 重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白
THPO重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His & Fc 標簽)
OBP2B重組人 OBP2B / Odorant-binding protein 2b 蛋白 Protein