細胞簡介:
小鼠結腸成纖維分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M”,將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環(huán)形、外縱行兩層平滑肌),外膜(纖維膜或漿膜)。結腸成纖維細胞主要分布于外膜(纖維膜或漿膜)結締組織內。成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的結腸成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠結腸成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠結腸成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 結腸 | 產品貨號 | YS-01X7979 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 |
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠結腸成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠髓細胞觸發(fā)受體1(EM1)試劑盒 ,英文名: EM1 ELISA Kit
Mouse glycogen phosphorylase BB (GP-BB) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)試劑盒
ratprolactin,PRLELISAKit 大鼠催乳素(PRL)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHIV(Humanai-immunodeficiencyvirusaibody)ELISAKit人抗人類免疫缺陷病毒抗體
細胞PYK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKit5-HT大鼠5羥色胺
小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠Ⅰ型膠原C端肽試劑盒、小鼠Ⅰ型膠原C端肽eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠8異前列腺素試劑盒 小鼠8異前列腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠8異前列腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠8異前列腺素試劑盒、小鼠8異前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠8羥基脫氧鳥苷試劑盒、小鼠8羥基脫氧鳥苷eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
小鼠6前列腺素試劑盒 小鼠6前列腺素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠6前列腺素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠6前列腺素試劑盒、小鼠6前列腺素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
胰島素受體β抗體
小鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒
Human aquaporin 2 (AQP-2) ELISA Kit 人水通道蛋白2(AQP-2)試劑盒
Humancholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit 人酯轉移蛋白(CETP)試劑盒 進口分裝
Humanapelin13,AP13試劑盒人apelin13(AP13)試劑盒
植物氧化應激活性氧(ROS)熒光測定試劑盒(次氯酸離子)20次
Humaotalprostatespecificaigen,tPSAELISAKit人總前列腺特異抗原(tPSA)試劑盒
PE標記人CD45RO單克隆抗體
S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標簽) Protein
次0酸核糖基轉移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)
ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標簽)
小鼠結腸成纖維細胞ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標簽)
FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白
TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標簽) Protein