細胞簡介:
小鼠腦靜脈血管平滑肌分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經腦深部靜脈和腦血竇流入頸內靜脈;小部腦靜脈血經眼部翼狀靜脈叢,進入靜脈導血管再到頭皮,后流入椎管中的椎旁靜脈系統。腦靜脈系統有大量交通枝靜脈叢,即使兩側頸內靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經椎靜脈和頸外靜脈系統完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腦靜脈血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腦靜脈組織 | 產品貨號 | YS-01X7341 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠β細胞素(BTC)試劑盒 ,英文名: BTC ELISA Kit
Mouse esadiol receptor (ER) ELISA Kit 小鼠雌二醇受體(ER)試劑盒
ELISA 小鼠核轉錄因子p65(mouse NF-kBp65) 進口分裝
CLIAKitforIL-15ELISAKIT大鼠白介素15
通用型馬萊姆癥嗜吞噬細胞無形體(LymeandAnaplasmaPhagocytophilum)試劑盒20次
ELISAKitANG-R-Tie1大鼠血管生成素受體Tie1
無形體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
東方體核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
人皰疹病毒6型(HHV-6)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
(OC43/HKU1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
PE標記小鼠CD62L單克隆抗體
小鼠第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒
Human fetal hemoglobin (HBF) ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白(HBF)試劑盒
HumanHerpessimplexvirus2,HSV-Ag2ELISAKit 人單皰疹病毒抗原2(HSV-Ag2)試劑盒 進口分裝
Humanarylhydrocarboeceptor,AhR試劑盒人芳香烴受體(AhR)試劑盒
植物源性食品芥末(mustard)試劑盒20次
Humahymosinα1ELISAKit人肽α1(Thymosinα1)試劑盒
微絲相關蛋白3樣抗體
GREM1重組小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 標簽) Protein
蛋白酶激活受體4(PAR4)重組蛋白 Recombinant Protease Activated Receptor 4 (PAR4)
CFL1重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標簽) Protein
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)
TNFRSF10D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 (His 標簽)
小鼠腦靜脈血管平滑肌細胞A Beta1-40 (mutation type, MT 0.1mgA Beta1-40 (mutation type, MT) peptide 突變型β淀粉樣肽1-40
FETUB Protein Human 重組人 Fetuin-B / FETUB 蛋白 (His 標簽)
CD83重組小鼠 CD83 / HB15 蛋白 (His 標簽) Protein
IFNG Protein Rat 重組大鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
ABHD14B重組人 ABHD14B 蛋白 (His 標簽) Protein