細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡介：
小鼠腦膜分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腦膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 腦膜組織 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7693 |
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-CP)試劑盒 ，英文名： β-CP ELISA Kit
Mouse esadiol (E2) ELISA Kit 小鼠雌二醇(E2)試劑盒
ELISA 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-9(mouse MMP-9) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-16(HumanIerleukin16)ELISAKIT人白介素16
通用型硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitBK大鼠血管舒緩激肽
無水碳酸鈣 100g
Calciumte,Anhydrous 500g
化鈣 100g
CalciumChloride,Dihydrate 500g
PE標(biāo)記人CD23單克隆抗體
小鼠抵抗素(Resistin)ELISA 試劑盒
Rat Neuroglobin (NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白(NGB)試劑盒
humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanarylsulfataseA,ASA試劑盒人芳基酯酶A(ASA)試劑盒
植物源性食品開心果(Pistachio)試劑盒20次
HumahymosinELISAKit人肽(Thymosin)試劑盒
外殼蛋白COPE抗體
CD70重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FADD (Fas-associated protein with death domain 0.5mgFADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原
ST6GAL1重組人 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)
TLR3 Protein Mouse 重組小鼠 TLR3 / CD283 蛋白 (His 標(biāo)簽)
小鼠腦膜成纖維細(xì)胞FADD (Fas-associated protein with death domain 0.5mgFADD (Fas-associated protein with death domain) Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原
FGF14 Protein Human 重組人 FGF14 / SCA27 蛋白 (isoform 1B)
CD70重組大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TLR3 Protein Mouse 重組小鼠 TLR3 / CD283 蛋白 (His 標(biāo)簽)
ST6GAL1重組人 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
