細胞簡介:
小鼠神經少突膠質分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變,還會引起神經元損傷或精神類疾病,甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間;②神經細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的灰質區,常位于神經細胞周圍,與神經細胞的關系密切,故又稱為神經細胞周衛星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是為特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經發育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質采用消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠神經少突膠質經GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 腦組織 | 產品貨號 | YS-01X7563 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠雌三醇(E3)試劑盒 ,英文名: E3 ELISA Kit
Mouse collagen type III (Col III) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒
ELISA 小鼠細胞色素P450(mouse Cytochrome P450) 進口分裝
CLIAKitforLH(Rabbitleoopichormone)ELISAKit兔子促黃體激素
通用型HHV6-B(HUMANHERPESVIRUS6-B)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitHSPgp96熱休克蛋白糖蛋白96
兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISAKit ELISA.
兔子補體蛋白4(C4)ELISAKit ELISA.
兔子血小板衍生生長因子(PDGF)ELISAKit ELISA.
兔過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit ELISA.
G蛋白偶聯受體112抗體
小鼠病毒(MMTV)ELISA 試劑盒
Human endothelial niic oxide syhase (eNOS) ELISA Kit 人內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
HumanβLactoglobulin,β-LgELISAKit 人β乳球蛋白(β-Lg)試劑盒 進口分裝
GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOS試劑盒豚鼠內皮型合成酶(eNOS)試劑盒
真菌/酵母0脂酶D2(PhospholipaseD2)活性熒光定量試劑盒20次
MouseChorionicGonadoophinβ,β-CGELISAKit小鼠絨毛膜β(β-CG)試劑盒
鈣調素調節蛋白相關蛋白抗體
CRP重組人 CRP / C-Reactive 蛋白 Protein
T7 tag(recombinant T7-tagged proteins 0.5mgT7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗原
FCGR1重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標簽) Protein
G6B Protein Human 重組人 G6B / C6ORF25 蛋白
THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)
小鼠神經少突膠質細胞T7 tag(recombinant T7-tagged proteins 0.5mgT7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗原
G6B Protein Human 重組人 G6B / C6ORF25 蛋白
CRP重組人 CRP / C-Reactive 蛋白 Protein
THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標簽)
FCGR1重組人 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標簽) Protein