細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠視網膜Muller分離自視網膜組織;視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經乳頭。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞,約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力強。視網膜Muller細胞作為視網膜中的主要膠質細胞,大約占視網膜膠質細胞的90%,因而在視網膜疾病中起著何種作用也受到越來越多的關注。在超微結構水平上,Muller細胞的胞質似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發達的內質網,細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態也會有所差異的。視網膜Muller細胞是一種特化的神經膠質細胞,不僅具有維持視網膜的正常結構和功能的作用,并調制視網膜神經元活動,還能參與多種病理過程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網膜病變、增生性糖尿病視網膜病變等,體外培養Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠視網膜Muller采用膠原酶消化法和反復消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠視網膜Muller經GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 視網膜組織 | 產品貨號 | YS-01X7377 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠軟骨糖蛋白39(GP39)試劑盒 ,英文名: GP39 ELISA Kit
Mouse bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒
RatDehydroepiandrosterone,DHEAELISAKit 大鼠脫輕表雄酮(DHEA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHAELISAKit大鼠透明質酸
細胞半乳糖總含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit大鼠血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規格:96T/48T
兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒 兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子巨噬細胞性蛋白1α試劑盒、兔子巨噬細胞性蛋白1α 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒、兔子抗中性粒細胞顆粒抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒 兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子可溶性細胞間粘附分子1試劑盒、兔子可溶性細胞間粘附分子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒 兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒 規格型號:96T/48T 兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),產品別名:兔子可溶性血管細胞粘附分子1試劑盒、兔子可溶性血管細胞粘附分子1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。
8號染色體開放閱讀框59抗體
小鼠白介素23(IL-23)ELISA 試劑盒 96T/48T
People deoxidizing urine three phosphoric acid (DP) ELISA Kit 人脫氧尿三0酸(DP)試劑盒
HumanCalcitonin,CTELISAKit 人降鈣素(CT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancarcinoembryonicaign,CEA試劑盒人癌胚抗原(CEA/CD66)試劑盒規格:96T/48T
重組腺病毒效價比色法定量試劑盒50次
HumansolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit人可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規格:96T/48T
低密度脂蛋白受體相關蛋白4抗體
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein
GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白
小鼠視網膜Muller細胞Thymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1 0.5mgThymosin Alpha-1 α-1 (-Thymosin alpha-1)
GH1 Protein Human 重組人 GH1 / Growth hormone 1 蛋白
GAG-P24重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 蛋白 (group M, subtype B, strain 92418) Protein
LAIR2 Protein Human 重組人 LAIR2 / CD306 蛋白
OXSR1重組人 OXSR1 / OSR1 蛋白 (GST 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取