細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠外周血白分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。白細胞(Leukocyte),舊稱白血球,血液中的一類細胞。根據白細胞的細胞質內有無特殊顆粒,可將其分為有粒白細胞和無粒白細胞。前者常簡稱為粒細胞,根據其特殊顆粒的染色特性,又分為中性粒細胞、嗜堿性粒細胞和嗜酸性粒細胞,白細胞也通常被稱為免疫細胞。在顯微鏡下可以看到,血細胞中體積比較大、數量比較少,具有細胞核;其主要作用是吞噬細菌、防御疾病。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠外周血白采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠外周血白經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X7104 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 圓形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒 ,英文名: LTC4 ELISA Kit
Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 進口分裝
CLIAKitforIRAK(Humanierleukieceptorassociatedkinase)ELISAKit人白介素受體相關激酶
通用型非變性裂解液適合各種細胞native蛋白
ELISAKitACS大鼠脂酰合成酶
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
兔環0酸腺苷(cAMP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
18號染色體開放閱讀框1抗體
小鼠白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human advanced glycation end product receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)試劑盒
HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCaspase-9,Casp-9試劑盒人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒規格:96T/48T
轉基因油菜(canola)HCN28品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA3110050K21geneELISAKit人類似RIKENcDNA3110050K21基因試劑盒規格:96T/48T
磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體
THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein
bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白
BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標簽)
小鼠外周血白細胞CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環肽
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein
TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取