細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠外周血白分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開(kāi)始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。白細(xì)胞（Leukocyte），舊稱白血球，血液中的一類細(xì)胞。根據(jù)白細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無(wú)特殊顆粒，可將其分為有粒白細(xì)胞和無(wú)粒白細(xì)胞。前者常簡(jiǎn)稱為粒細(xì)胞，根據(jù)其特殊顆粒的染色特性，又分為中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞，白細(xì)胞也通常被稱為免疫細(xì)胞。在顯微鏡下可以看到，血細(xì)胞中體積比較大、數(shù)量比較少，具有細(xì)胞核；其主要作用是吞噬細(xì)菌、防御疾病。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血白采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠外周血白經(jīng)過(guò)檢測(cè)，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來(lái)源 | 外周血 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7104 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 圓形 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒 ，英文名： LTC4 ELISA Kit
Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIRAK(Humanierleukieceptorassociatedkinase)ELISAKit人白介素受體相關(guān)激酶
通用型非變性裂解液適合各種細(xì)胞native蛋白
ELISAKitACS大鼠脂酰合成酶
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
18號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框1抗體
小鼠白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human advanced glycation end product receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)試劑盒
HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCaspase-9,Casp-9試劑盒人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)基因油菜(canola)HCN28品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA3110050K21geneELISAKit人類似RIKENcDNA3110050K21基因試劑盒規(guī)格：96T/48T
磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體
THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein
bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白
BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
小鼠外周血白細(xì)胞CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環(huán)肽
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein
TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
