細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見,細胞中粗面內質網和高爾基體均不發達。當組織受損時,纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質網較少,高爾基復合體不發達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網狀纖維以及基質成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質外的合成,當心肌損傷時能產生旁分泌生長因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中常見的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維及有機基質,并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變為幼稚的成纖維細胞,其功能活動也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學研究成為現代心血管領域研究的一個重點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠心臟纖維原采用膠原酶消化法制備而來制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠心臟纖維原經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 心臟組織 | 產品貨號 | YS-01X7587 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠轉膠蛋白(TAGLN)試劑盒 ,英文名: TAGLN ELISA Kit
Mouse ai smooth muscle aibody (ASMA) ELISA Kit 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒
Mousealkalinephosphatase,ALPELISAKit 小鼠堿性0酸酶(ALP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumanLeishimariaaibodyELISAKit人利什曼原蟲抗體
脘蛋白基因變異分析試劑盒20次
ELISAKitEMAIgA大鼠抗肌內膜抗體IgA
兔血管細胞粘附分子-1(rabbit VCAM-1) 作用: ELISA
兔血管內皮生長因子(rabbit VEGF) 作用: ELISA
兔血管性血友病因子(rabbit VWF) 作用: ELISA
兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40) 作用: ELISA
過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體
小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒
Humanplacealribonucleaseinhibitor,HPRIELISAKit 人胎盤核糖核酸抑止劑(HPRI)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCiliaryNeuroophicFactor,CF試劑盒人睫狀神經營養因子(CF)試劑盒規格:96T/48T
組(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
humanS100calciumbindingproteinA8/calgranulinA,S100A8ELISAKit人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)試劑盒規格:96T/48T
死亡相關蛋白激酶1抗體
IFNA4重組小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 Protein
肌球蛋白輕鏈2(MYL2)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2)
APP重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標簽) Protein
HAO1 Protein Human 重組人 HAO1 / GOX1 蛋白
NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白
小鼠心臟纖維原細胞肌球蛋白輕鏈2(MYL2)重組蛋白 Recombinant Myosin Light Chain 2, Regulatory, Cardiac (MYL2)
HAO1 Protein Human 重組人 HAO1 / GOX1 蛋白
IFNA4重組小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 Protein
NOV Protein Canine 重組狗 CCN3 / NOV 蛋白
APP重組人 Beta-amyloid 39 / Beta-APP39 蛋白 (aa 672-710, His & GST 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取