細胞簡介:
小鼠主動脈平滑肌分離自主動脈組織;主動脈是體循環的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側第2胸肋關節高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關節高度分為髂內、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發生、發展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關發病機制是目前研究的熱點;體外培養的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠主動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠主動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 主動脈組織 | 產品貨號 | YS-01X7276 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠促腎上腺皮質素釋放激素結合蛋白(CRHBP)試劑盒 ,英文名: CRHBP ELISA Kit
P selectin (P-S 人P選擇素(P-S
Ratsolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforCT-1ELISAKit大鼠心肌營養素1
細胞涂片巴氏(papanicolaou;PAP)染色試劑盒50次
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit大鼠抗子宮內膜抗體(EMAb)試劑盒規格:96T/48T
小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規格
小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
FAM162A蛋白抗體
小鼠C(VC)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human phosphatidylinositol specific phospholipase C (PIPLC) ELISA Kit 人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)試劑盒
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPGELISAKit 人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenLeukemiainhibitoryfactor,LIF試劑盒雞白血病抑制因子(LIF)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞JNK/SAPK蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)試劑盒規格:96T/48T
耳聾-甲狀腺腫綜合征相關COBL蛋白抗體
LYPD3重組小鼠 C4.4A / LYPD3 蛋白 Protein
Alpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原 0.5mgAlpha-Synuclein 核突觸蛋白(抗原)
NLK重組人 nemo-like kinase / NLK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
ENPEP Protein Rat 重組大鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 蛋白 (aa 41-945, His 標簽)
小鼠主動脈平滑肌細胞半乳糖凝集素9(GAL9)重組蛋白 Recombinant Galectin 9 (GAL9)
CDON Protein Human 重組人 CDON / CDO 蛋白
EGFR重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
IL2RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL2RA 蛋白
LYZL2重組人 Lysozyme 2 / LYZL2 蛋白 Protein