細(xì)胞傳代步驟：
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠胎盤絨毛膜分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后，在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起，以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸，外裹合體滋養(yǎng)層，稱初級(jí)干絨毛。胚外中胚層長(zhǎng)入初級(jí)干絨毛的中軸，使初級(jí)干絨毛變成了次級(jí)干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織，并與胚體內(nèi)的血管相通時(shí)，次級(jí)干絨毛改稱三級(jí)干絨毛。三級(jí)干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育，叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤，而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤絨毛膜采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤絨毛膜經(jīng)hCG免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | |
組織來源 | 胎盤 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X8530 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形 |
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠胎盤絨毛膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞復(fù)蘇步驟:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠熱休克蛋白β6(HSPβ6)試劑盒 ，英文名： HSPβ6 ELISA Kit
Mouse vascular endothelial cell growth factor receptor 1 (VEGFR-1) ELISA Kit 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1)試劑盒
RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforGTE-AGE(HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts)ELISAKit人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物
細(xì)胞超長(zhǎng)鏈脂酰脫氫酶(ACYLCOADEHYDROGENASE)活性比色法定量試劑盒20次
Rattumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit ELISA
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISAKit ELISA
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISAKit ELISA
小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISAKit ELISA
泛素特異性蛋白酶OTB1抗體
APC標(biāo)記的單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體
CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein
BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)
ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein
CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白
COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
BCHE(butyrylcholinesterase 0.5mgBCHE(butyrylcholinesterase)CT 丁酰脂酶抗原(C端)
CLEC3B Protein Human 重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白
CES5A重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白 Protein
COL4A3 Protein Rat 重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ENTPD5重組人 ENTPD5 蛋白 Protein
小鼠胎盤絨毛膜細(xì)胞小鼠水通道蛋白2(AQP-2)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat maix metalloproteinase 10 (MMP-10) ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)試劑盒
HumanMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISAKit 人粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
DuckIerferonγ,IFN-γ試劑盒鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞組蛋白熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousediamineoxidase,DAOELISAKit小鼠氧化酶(DAO)試劑盒規(guī)格：96T/48T
細(xì)胞凍存步驟:
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取
