細(xì)胞傳代步驟：

如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

小鼠胎盤羊膜分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長(zhǎng)成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營(yíng)養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長(zhǎng)出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的功能。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤羊膜采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胎盤羊膜經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

包被條件：PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠胎盤羊膜體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠膠原酶II(Collagenase II)ELISA 試劑盒

Rat ai endomeial aibody (EMAb) ELISA Kit 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)試劑盒

HumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit 樣轉(zhuǎn)錄體受體(ILTsR/LIR/CD85)試劑盒分裝

Humanai-cyclicciullinatedpeptide,CCP試劑盒人抗環(huán)胍肽抗體(CCP)試劑盒

植物活性線粒體分離試劑盒10次

Humanα1-microglobulin,α1-MGELISAKit人α1微球蛋白(α1-MG)試劑盒

志賀氏菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

痢疾桿菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

空腸彎曲菌(CJ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

非紅細(xì)胞血影腦蛋白β2/spectrin β III抗體

APC-Cy7標(biāo)記小鼠CD8a單克隆抗體

EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原

IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽) Protein

AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白

CD169/sialoadhesin(Sn 0.5mgCD169/sialoadhesin(Sn)(Sialic acid-binding Ig-like lectin 1;Siglec-1) CD169抗原

AGO3 Protein Human 重組人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPOR重組小鼠 EPOR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like Protein 1 蛋白

IL17RC重組人 IL17RC 蛋白 (aa 1-454, His 標(biāo)簽) Protein

小鼠胎盤羊膜細(xì)胞豬S-100B蛋白(S-100B)試劑盒

Human epidermal baseme membrane aibody (EBMZ) ELISA Kit 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)試劑盒

PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISAKit 豬表皮生長(zhǎng)因子(EGF)試劑盒分裝

CLIAKitforaGT(Mouseangiotensinogen)ELISAKit小鼠血管緊張素原

血液蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)試劑盒

細(xì)胞凍存步驟:

待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 
1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 
2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。
3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取