細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
小鼠終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織;椎體終板是椎體在生長發育過程中,椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈輕度凹陷,即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋,并終生存在,即為軟骨終板,上下軟骨終板與髓核和纖維環連接共同構成椎間盤。椎體終板構成了椎間盤的上下邊界,位于椎體中心的松質骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當的覆蓋其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體,同時具有平衡分散應力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內,這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,終板軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,終板軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠終板軟骨采用膠原酶 - 聯合消化并結合軟骨細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的小鼠終板軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 椎間盤 | 產品貨號 | YS-01X8547 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
包被條件:
培養基:含FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠終板軟骨體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA 試劑盒
Rat ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒
HumanconcanavalinA,ConAELISAKit 人刀A(ConA)試劑盒分裝
Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3試劑盒人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒
植物鈣ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
IL-1αELISAKit魚類白介素1α(IL-1α)試劑盒
植物D2(VD2)ELISAKit ELISA.
植物D3(VD3)ELISAKit ELISA.
植物D(VD)ELISAKit ELISA.
植物B6(VB6)ELISAKit ELISA.
電壓門控離子通道蛋白TPGS1抗體
6號染色體開放閱讀框64抗體
CD4重組大鼠 CD4 蛋白 (His 標簽) Protein
Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)
ULBP2重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白 Protein
ADSL Protein Human 重組人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 標簽)
FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 標簽)
Connexin-45(CX45 0.5mgConnexin-45(CX45) 間隙連接蛋白45(抗原)
ADSL Protein Human 重組人 ADSL / Adenylosuccinate Lyase 蛋白 (His 標簽)
CD4重組大鼠 CD4 蛋白 (His 標簽) Protein
FCGR1 Protein Mouse 重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His 標簽)
ULBP2重組人 ULBP2 / N2DL-2 蛋白 Protein
小鼠終板軟骨細胞豬(HYD)ELISA 試劑盒
Human methylansferase (Methylase) ELISA Kit 人甲基化酶(Methylase)試劑盒
guineapigIerferonγ,IFN-γELISAKit 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒分裝
CLIAKitforAng-IELISAKit大鼠血管緊張素Ⅰ
血液甘油三酯(iglyceride)含量酶連續循環反應比色法定量試劑盒20次
PorcineCompleme3,C3ELISAKit豬補體蛋白3(C3)試劑盒
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取