細胞簡介:
豬心臟微血管內皮分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養物質,并帶走代謝的終產物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內皮細胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細胞,它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。近年來大量研究表明,心肌微血管內皮細胞的功能和病理改變直接影響心肌細胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細胞模型在心肌缺血-再灌注發病機制和細胞間旁分泌細胞生長因子研究中起著重要作用。
方法簡介:
實驗室分離的豬心臟微血管內皮采用膠原酶-混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的豬心臟微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 心臟 | 產品貨號 | YS-01X8557 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 內皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:基礎培養基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
豬心臟微血管內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒 ,英文名: LTC4 ELISA Kit
Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒
ELISA 小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1) 分裝
CLIAKitforIRAK(Humanierleukieceptorassociatedkinase)ELISAKit人白介素受體相關激酶
通用型非變性裂解液適合各種細胞native蛋白
ELISAKitACS大鼠脂酰合成酶
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISAKIT ELISA
兔環0酸腺苷(cAMP)ELISAKit ELISA
兔血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISAKit ELISA
兔血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISAKit ELISA
磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體
18號染色體開放閱讀框1抗體
THSD1重組小鼠 THSD1 / TMTSP 蛋白 Protein
bovine Insulin protein 牛胰島素蛋白 10mgbovine Insulin protein 牛胰島素蛋白
BMPR1B重組人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MBL1 Protein Rat 重組大鼠 MBL1 蛋白 (Fc 標簽)
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP 0.5mgCCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜環肽
GOLM1 Protein Human 重組人 GOLM1 / GP73 蛋白
MEP1A重組小鼠 MEP1A 蛋白 Protein
TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Latent TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白
UBE2D4重組人 UBE2D4 蛋白 Protein
豬心臟微血管內皮細胞小鼠白介素1(IL-1)ELISA pcr檢測試劑盒
Human advanced glycation end product receptor (RAGE/AGER) ELISA Kit 人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)試劑盒
HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit 人N端中段骨鈣素(N-MID-OT)pcr檢測試劑盒分裝
HumanCaspase-9,Casp-9試劑盒人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒規格:96T/48T
轉基因油菜(canola)HCN28品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA3110050K21geneELISAKit人類似RIKENcDNA3110050K21基因試劑盒規格:96T/48T