細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
豬脂肪分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內皮功能、纖溶活動及炎癥反應,參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內分泌系統。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色)脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數量達到,此后數量一般不再增加。細胞內含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質泡,富含光面內質網。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質分解產熱,調節體內脂質比例。
方法簡介:
公司實驗室分離的豬脂肪采用消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的豬脂肪經油紅O染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 脂肪組織 | 產品貨號 | YS-01X7007 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠結合珠蛋白(Hpt)試劑盒 ,英文名: Hpt ELISA Kit
Mouse adiponectin (ADP) ELISA Kit 小鼠脂聯素(ADP)試劑盒
Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 大鼠血小板反應蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFlt3ELISAKit大鼠FMS樣酪激酶3
細胞基質金屬蛋白酶(MMP)總活性熒光定量試劑盒20次
Ratoxidizedlowdensitylipoproteinaibody,OLAbELISAKit大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)試劑盒規格:96T/48T
兔I型膠原(rabbit Collagen I) 作用: ELISA
兔II型膠原(rabbit Collagen II) 作用: ELISA
兔II型膠原C端肽(rabbit CTX-II) 作用: ELISA
兔D2聚體(rabbit 2-Dimer) 作用: ELISA
20號染色體開放閱讀框201抗體
小鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ) ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat plasminogen activator inhibitor (PAI) ELISA Kit 大鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒
Humanadrenomedullin,ADMELISAKit 人腎上腺髓質素(ADM)試劑盒 96T/48T 進口分裝
humancoicoopieleasinghormone,CRH試劑盒人促腎上皮質激素釋放激素(CRH)試劑盒規格:96T/48T
組織CHK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
Humanproteinphosphatase1regulatorysubunitA,PPP1R1AELISAKit人蛋酸酶1調控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)試劑盒規格:96T/48T
鳥苷酸環化酶β1抗體
S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein
CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白
豬脂肪細胞CD7 CD7抗原 0.5mgCD7 CD7抗原
IDH1 Protein Human 重組人 IDH1 蛋白
S100A6重組小鼠 S100A6 蛋白 Protein
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白
HIST2H2BE重組人 Histone cluster 2 H2BE / HIST2H2BE 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取