細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
雞外周血單核分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發育。當它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續增大,直徑可達50-80μm,細胞內所含的溶酶體顆粒和線粒體的數目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經常大量存在于淋巴結、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛機制,還產生一些能促進內皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞外周血單核采用密度梯度離心法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的雞外周血單核經CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 外周血 | 產品貨號 | YS-01X7054 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 巨噬細胞樣 |
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠雌二醇受體(ER)試劑盒 ,英文名: ER ELISA Kit
Mouse 5 nucleotidase (5-) ELISA Kit 小鼠5核苷酸酶(5-)試劑盒
ELISA 小鼠CXCL1/KC(mouse KC) 進口分裝
CLIAKitforLF/LTF(MouseLactoferrin)ELISAKIT小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白
通用型HPV7(HUMANPAPILLOMAVIRUS-7)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitMIF巨噬細胞移動抑制因子
同型半胱酸(Hcy)測定試劑盒(酶循環法)
β-(D3-H)測定試劑盒(酶比色法)
D-二聚體(D-Dimer)測定試劑盒(膠乳增強免疫比濁法)
轉鐵蛋白(F)測定試劑盒(免疫比濁法)
HERC4 E3泛素蛋白連接酶抗體
小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human gasin releasing peptide (GRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放多肽(GRP)試劑盒
Humanadrenergicalpha-1Areceptor,ADRA1AELISAKit 人能a1A受體(ADRA1A)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMR試劑盒人協同刺激分子受體(CMR)試劑盒規格:96T/48T
組織CLK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinkinaseA,PKAELISAKit人蛋白激酶A(PKA)試劑盒規格:96T/48T
干擾素α抗體
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein
rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原
ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白
雞外周血單核細胞rHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原 100ugrHBcAg 重組乙肝病毒核心抗原
IFNA8 Protein Human 重組人 Interferon alpha-B / IFNA8 蛋白
HA重組甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (28 Ser/Trp, His 標簽) Protein
GZMB Protein Human 重組人 Granzyme B / GZMB 蛋白
ULBP1重組人 ULBP1 / RAET1 / N2DL1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取