細胞簡介:
雞小腸黏膜上皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。
方法簡介:
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 小腸組織 | 產品貨號 | YS-01X7039 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 上皮細胞樣 |
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品:
大鼠雌一醇(E1)試劑盒 ,英文名: E1 ELISA Kit
Mouse 25 hydroxyvitamin D3 (25 (OH) ELISA kit D3/25 HVD3) ELISA Kit 小鼠25羥基3(25(OH)試劑盒D3/25 HVD3)試劑盒
ELISA 小鼠結締組織生長因子(mouse CTGF) 進口分裝
CLIAKitforLHELISAKit大鼠促黃體激素
通用型HHV6-A(HUMANHERPESVIRUS6-A)病毒定性試劑盒20次
ELISAKitADM腎上腺髓質素
鐵測試盒 Iron test case
錳測試盒 Manganese test case
鎳測試盒 Nickel test case
鹽快速測試盒 Niate rapid test case
GRWD1蛋白抗體
小鼠15-脂氧合酶(15-LOX)試劑盒 96T/48T
Human Pro gasin releasing peptide (ProGRP) ELISA Kit 人胃泌素釋放肽前體(ProGRP)試劑盒
HumanPeosidineELISAKit 人戊糖素(Peosidine)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCoxsackievirusIgM,CoxV-IgM試劑盒人柯薩奇病毒IgM(CoxV-IgM)試劑盒規格:96T/48T
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit人蛋白二硫化物異構酶A3(PDIA3)試劑盒規格:96T/48T
富含脯突觸相關蛋白SHANK1抗體
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
雞小腸黏膜上皮細胞Defensin Beta1(human 0.5mgDefensin Beta1(human) 防御素β1抗原(人)
IFNAR1 Protein Human 重組人 IFNAR1 / IFNAR 蛋白
CSF2重組大鼠 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein
NGF Protein Mouse 重組小鼠 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
S100A3重組人 S100A3 / S100E 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein