細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
雞關節軟骨分離自關節軟骨組織;關節軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節面,這種結構使關節軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節軟骨的正常代謝。關節軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養成分必須從關節液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節液中,關節軟骨的這種營養代謝必須通過關節運動,使關節軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節運動對于維持關節軟骨的正常結構起重要的作用。關節軟骨細胞位于關節軟骨陷窩內。幼稚的關節軟骨細胞位于關節軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節軟骨表面平行,越向深層的關節軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數量不一的脂滴。成熟的關節軟骨細胞多2-8個成群分布于關節軟骨陷窩內,這些關節軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的雞關節軟骨采用膠原酶聯合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的雞關節軟骨經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 關節軟骨 | 產品貨號 | YS-01X8279 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 梭形、多角形 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每3-4天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:梭形、多角形
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
雞關節軟骨體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠β內啡肽受體(β-EPR)試劑盒 ,英文名: β-EPR ELISA Kit
Mice female three alcohol (E3) ELISA Kit 小鼠雌三醇(E3)試劑盒
ELISA 小鼠神經營養素3(mouse -3) 進口分裝
CLIAKitforIL-12/P70ELISAKit大鼠白介素12
通用型馬鈴薯卷葉病毒(PotatoLeafrollVirus;PLRV)試劑20次
ELISAKitANG大鼠血管生長素
山羊免疫球蛋白G 英文名稱: Immunoglobulin G 英文縮寫: IgG
綿羊促卵泡生成激素 英文名稱: Follicle Stimulating Hormone 英文縮寫: FSH
綿羊免疫球蛋白A 英文名稱: Immunoglobulin A 英文縮寫: IgA
綿羊免疫球蛋白G 英文名稱: Immunoglobulin G 英文縮寫: IgG
RAS癌基因相關蛋白RAB6B抗體
豚鼠神經蛋白聚糖(NCAN)試劑盒 ,英文名: NCAN ELISA Kit
Human low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 人低分子肝素(LMWH)試劑盒
Rhesusmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/RhLAELISAKit 恒河猴主要組織相容性復合體(MHC/RhLA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBK(HumanBradykinin)ELISAKit人血管舒緩激肽
細菌尼羅紅染色試劑盒100次
Rabbitlymphocytefunctionassociatedaigen3,LFA-3ELISAKit兔淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒規格:96T/48T
細胞分裂周期蛋白2抗體
Western二抗稀釋液 100ml
TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor 0.5mgTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性特異性生長因子抗原
CDH2重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2D 蛋白 Protein
IL17A & IL17F Protein Human 重組人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白
IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽)
雞關節軟骨細胞TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor 0.5mgTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性特異性生長因子抗原
IL17A & IL17F Protein Human 重組人 IL17A & IL17F Heterodimer 蛋白
Western二抗稀釋液 100ml
IL1R1 Protein Human 重組人 IL1R1 / CD121a 蛋白 (Fc 標簽)
CDH2重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2D 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取